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现一个新的SNP位点,杂合率为4%。说明DHPLC不仅可以分析已知的突变,也可以筛查未知的突变。
2.微卫星的检测:微卫星不稳定性(MSI)是指由于复制错误引起的简单重复序列的改变,目前
认为以MSI为表型的突变体通路是人类恶性肿瘤发生的分子生物学主要模式之一。传统的MSI检测方
法费时、费力、价格昂贵,有的还引起环境污染、危害健康等,不利于推广应用。我们首次运用变性
优点,值得推广应用。
3.小卫星的检测:C60rf37基因是2002年发现的一个与视网膜疾病相关的基因,我们实验室在
1999年建立的结肠腺瘤相对于正常黏膜的差减文库中筛选到该基因。在获得C60rf37基因的全长后,
一个新的遗传标记,可以进行连锁分析,定位疾病易感基因等。
4.小片段缺失或插入的检测:MMPI是基质金属蛋白酶家族中表达量最高的间质胶原酶,其高表
达与肿瘤的浸润、转移以及预后有关。MMPI基因启动子区发现了-1607IG/2G插入/缺失多态性,有
研究表明该多态性与肺癌、卵巢癌和结直肠癌等的发生、发展或预后有关。但仍需通过各种大样本研
究来进一步证实2G等位基因是肿瘤的一个危险因素。文献报道的MMPI一1607IG/2G多态性的检测方
法有直接测序法,虽然结果准确、直观,但是通量较低,成本偏高;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测费
时、费力,敏感性欠佳;PCR-RFLP则有可能出现酶切不完全,影响了结果的可靠性。我们首次建立
了DHPLC检测gMPI一1607IG/2G多态性的方法体系,达到了准确、快速、高效和自动化的检测目的,
使得脚卜1607IG/2G多态性的大规模检测成为可能。
总之,DHPLC作为一种新型的核酸分析系统,将为肿瘤分子病理学提供有效的技术平台。
胰腺导管腺癌中髓I【2/neu和拓扑异构酶Ⅱa基因的
变化及相关性分析
梁智勇王文泽高洁武莎斐曾琏刘彤华
中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院病理科。100730
体,在多种肿瘤中都有扩增,并且与某些肿瘤尤其是乳腺癌预后密切相关,目前已有多种针对
治疗具有明显的疗效,因此检测HER2/neu基因状态对于指导肿瘤的靶向性治疗具有重要意义。近年
a
起的,而是与HER2/neu和TopoisomeraseII
TOP2A在多种包含增生细胞的组织中表达,如增生的子宫内膜、精母细胞,而在终末分化的细胞则不
示这两种基因在肿瘤发生过程中可能存在功能联系,并且二者的共同扩增已被用来指导一些肿瘤治疗
方案的制定。本研究拟通过免疫组织化学和荧光原位杂交2种方法检测胰腺癌组织、慢性胰腺炎及正
系及与临床病理特征之间的相关性。
试剂为鼠抗人单克隆抗体HER2/neu检测试剂盒、鼠抗入单克隆抗体人拓扑异构酶IIa(TOV2A)
2004年手术切除的胰腺导管腺癌标本26例,慢性胰腺炎10例,正常胰腺组织(取自胰岛细胞瘤周
结果判读:HER2/neu阳性为细胞膜着色。阴性一:无细胞染色或少于10%的肿瘤细胞细胞膜较弱染
色;+:大于10%的肿瘤细胞细胞膜部分较弱染色;++:大于10%的肿瘤细胞完整细胞膜较弱到中等
染色:+++:大于10%的肿瘤细胞完整细胞膜强染色。TOP2A阳性为细胞核着色,其阳性结果按记
数200个细胞中阳性细胞百分比(阳性肿瘤细胞核数/所有肿瘤细胞核数×100)计算。并用多色荧光
杂交信号比值在1_8~2.2之间定义为低水平扩增,比值超过2.2定义为高水平扩增。应用student’t
检验和卡方检验进行统计分析。
胰腺导管腺癌26例,患者年龄从35~72岁,平均58岁,其中高分化8例,中分化12例,低分
化6例,10例有淋巴结转移,3例育肝转移。26例胰腺癌组织中TOP2A阳性表达指数从0.5%至70%;
基因扩增。结果显示,在选择针对HER2/neu行靶向治疗的胰腺癌患者时,有必要联合检测TOP2A
和HEP.2/neu两个基因,此两种基因共同扩增才是有效用药的前提,这在以往对乳腺癌等肿瘤的治疗
中已有报道/但在胰腺癌治疗中的意义还需深入研究。
软组织黏液性病变的细针吸取细胞学
王念黎狄方
澳门镜湖医院病理科
间质的黏液变性几乎见于所有的软组织病变。软组织黏液性病变是指大量细胞外黏液的堆积。使
形态上呈明显黏
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