唐古特大黄ISSR-PCR 反应条件的优化.pdfVIP

广 西 植 物 Guihaia 　30 ( 1) : 112 - 116 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 2010 年 1 月 　 唐古特大黄 ISSRPCR 反应条件的优化 1 ,2 1 ,2 1 1 ,2 1 胡延萍 , 谢小龙 , 王 　莉 , 杨 　建 , 李 　毅 ( 1. 中国科学院 西北高原生物研究所 高原适应与进化重点实验室 , 西宁 810001 ; 2 . 中国科学院 研究生院, 北京 100049 ) 摘 　要 : 利用单因素试验对影响唐古特大黄 ISSRPCR 扩增的重要参数进行优化 , 以期建立其最佳反应条件 。 μ ( ) 结果如下:20 L 反应体系包括 1. 5 ×PCR buffer 15 mmol/ L TrisHCl ,75 mmol/ L KCl ,1. 00 mmol/ L MgCl2 ,0 . μ 6U Taq DNA 聚合酶 ,0 . 125 mmol/ L dN TP ,0 . 5 mol/ L 引物和 30 ng 模板 DNA ; 引物 UBC888 适宜的退火温度 为 57 . 4 ℃。ISSR 反应条件的建立为利用分子标记技术研究唐古特大黄居群遗传多样性奠定了良好基础 。 关键词 : 唐古特大黄 ; ISSRPCR ; 优化 ( ) 中图分类号 : Q943 　　文献标识码 : A 　　文章编号: 2010 Establishment and optimization of ISSRPCR reaction conditions for Rheum t an guticum HU YanPing1 ,2 , XIE XiaoLong1 ,2 , WAN G Li1 , YAN G Jian1 ,2 , L I Yi1 ( 1. Key L aboratory of A dap tation and Evol ution of Plateau B iota , N orthw est I nstitute of Plateau B iology , Chinese A cademy of S ciences , Xining 810001 , China ; 2 . Graduate University of Chinese A cademy of S ciences , Beij ing 100049 , China ) ( ) Abstract : InterSimple Sequence Rep eat s ISSR is a good molecular marker for r