09第九章 分光光度法.pptVIP

* 第九章 可见-紫外分光光度法 Vis-UV Spectrophotometry 第一节 分光光度法基本原理 第二节 可见分光光度法 * 第一节分光光度法基本原理 一、光的基本性质 什么是光？ 光是以电磁波形式传播的光子流。 2. 光的波粒二象性 光的波动性表现在传播时：C =λ?（衍射） 光的粒子性表现在能量的吸收或辐射时 : ⊿E = h ? 也就是说 ， 光的波长与频率成反比，波长越小，频率越大；频率越大，光子的能量越高。 * 二、 物质对光的选择性吸收 1. 物质的颜色 2.互补色光 若两种颜色的光可以按适当的强度比例混合成白光，则称这两种颜色的光为互补色光。 紫 400 红 660 橙 600 黄 560 绿 530 青蓝 500 蓝 450 青 420 白光 单色光 : 单一波长的光。 复色光 : 含有多种波长的光。 * 3. 物质的颜色与物质对光的吸收 当一束白光照射到某溶液时，如果溶液选择性地吸收某一频率的光，那么溶液会出现什么现象？ 溶液会呈现出颜色，呈现出它所吸收光的互补色。 即: 物质所呈现的颜色就是它所吸收光的互补色。 若物质对光（白光）全不吸收，则呈白色或无色； 若物质对光全部吸收，则呈黑色； 若物质只吸收某一频率的光（某色光）, 则它就 呈现它所吸收光的互补色。 4. 物质的结构与颜色 物质的结构不同, 则吸收光的频率不同, ∴颜色不同。 * 波长 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500mm 1cm 1m 光谱 ? 射线 X 射线 紫外光 可见光 红外光 微波 无线电波 可见光的电磁波谱图 5. 电磁波谱 电磁波谱图： 以电磁波的波长大小顺序排列的谱图。 * 三、 物质的吸收光谱 任何一种溶液对不同波长的光的吸收程度是不同的。若以入射光的波长为横坐标，以溶液对该波长的吸收程度为纵坐标作图，可得一曲线，这条曲线称为该物质的吸收光谱（absorption spectrum), 也称为吸收曲线(absorption curve). ? A 480 520 560nm ?max=515nm 吸收光谱 * 从图可以看到： 1. 同一浓度的溶液对不同波长的光吸收程度不同； 2. 同一种物质的不同浓度的溶液，吸收光谱的形状基本相同，最大吸收波长?max也一样。 在实际测量中，通常选择?max作为测定波长。 吸收光谱说明，一种物质对不同波长的光的吸收程度是不同的。 右图是三( 邻二氮菲)合铁配合物的吸收光谱。 * I0 = Ia + It + Ir 在实验中，标准溶液和被测溶液分别置于同样质地和厚度的比色杯中，反射光强度Ir大小近似可相互抵消，所以有：I0 = Ia + It 溶液对光的吸收越多，透过的就越少。 I0 It Ia Ir 分光光度法基本原理 一、溶液对光的吸收 Ia – absorption It – transmission Ir – reflection * 二、透光率 (transmittance) 定义：透射光的强度 It 与入射光的强度I0 的比值 称为透光率。 T = It I0 透光率是从透射的角度来反映物质对光的吸收的。显然，透光率越大，表示物质对光的吸收越少。 若 T= 0，说明入射光全部被吸收； 若 T=1，说明入射光全部被透射，没有吸收； 若 0 ＜T＜1，说明入射光一部分被吸收，一部分被透射。 * 三、吸光度(absorbance) 定义：透光率的负对数称为 吸光度 A。 = lg I0 It A= - lgT 吸光度反映着物质对光的吸收程度，吸光度愈大，表示溶液对光的吸收愈多。 * 二、Lambert- Beer 定律 当一适当波长的单色光照射到溶液上时： Lambert定律 当浓度一定时，其吸光 度A与液层的 厚度b成正比： A=k1b Beer 定律 当液层的厚度一定时，其吸光 度A与 浓度c 成正比： A=k2 c Lambert- Beer 定律 A = ? b c ? 摩尔吸光系数：L ·mol-1 ·cm-1 c 物质的量浓度：mol · L-1 b 液层厚度： cm