百里醌联合吉西他滨对胰腺癌BxPC3细胞体外生长影响优秀参考文档.pdfVIP

· 论 蓄 · JMedRes，Sep2014，Vo1．43No．9 百里醌联合吉西他滨对胰腺癌 BxPC一3 细胞体外生长的影响 慕刚刚 于红刚 李红艳 张玲利 摘 要 目的 探讨百里醌联合吉西他滨对胰腺癌BxPC一3细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法 采用CCK 一 8法检测细胞相对活性，Hoechst染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况 ，Westernblot法检测凋亡相关蛋 白(Bcl一2、Bax、XI． AP)、半胱天冬酶(cleaved—caspase一3、cleaved—easpase一9)、PTEN、Akt及 phospho—Akt蛋 白的表达。结果 百里醌呈浓度依 赖性地抑制胰腺癌 BxPC一3细胞增殖，诱导细胞凋亡。吉西他滨组 (GEM)、百里醌组 (TQ)、百里醌联合吉西他滨组 (TQ+ GEM)、百里醌与吉西他滨序贯给药组 (TQ—GEM)相对细胞活性分别为 83．7％ 4-4．1％、51．8％ ±6．O％、48．25％ ±6．50％、 33．3％ ±3．9％；早期凋亡率分别为 l2．2％ ±3．8％、30．4％ 4-4．3％、43．5％-45．7％、58．3％-46．1％；各组相对细胞活性均明显 低于对照组(P0．05)，而细胞凋亡率显著增高 (P0．05)；与GEM组比较，TQ—GEM组与TQ+GEM组相对细胞活性明显下调 (P0．001)，凋亡率明显上调(P0．001)；TQ—GEM组较 TQ+GEM组 出现更 明显的增殖受抑 (P0．001)，更高的细胞凋亡率 (P0．001)。百里醌 一吉西他滨序贯给药作用于胰腺癌BxPC一3细胞后，BxPC一3细胞中Bax蛋 白表达明显下调，而Bcl一2、 XIAP、cleavedcaspase一3、cleavedcaspase一9蛋 白表达明显上调。百里醌可显著上调 BxPC一3细胞 PTEN 的表达 ，明显抑制 Akt 磷酸化。结论 百里醌可明显增强吉西他滨对体外胰腺癌细胞生长抑制作用，可能是通过上调 PTEN，Akt去磷酸化，促使Bcl一 2、XIAP表达上调及 Bax表达下调 ，活化 caspase一3、caspase一9诱导细胞凋亡而实现 。 关键词 胰腺癌 百里醌 吉西他滨 细胞凋亡 序贯治疗 [中图分类号] R576 【文献标识码] A ThymoquinonePotentiatesAntitumorActivityofGemcitabineinPancreaticCancerBxPC 一3CeHsinvitro． M u Ganggang．YuHong- gang，LiHongyan，ZhangLingli．DepartmentofGastroenterology，RenminHospitalofWuhanUniversity，Hubei430060，China Abstract Objective Toinvestigatetheeffectofthymoquinoneonthesensitizationofpancreaticcancercellstogemeitabineandex— ploreitsmechanism．M ethods HumanpancreaticcancerPANC 一1cellswereculturedinvitroandtreatedwith thymoquinone，gemcit— abine，thymoquinonecombinedwithgemcitabine，andsequentialadministrationofthymoquinoneandgemeitabine．Therelativecellviabil— ity，cellapoptosis，expressionofBcl一2，Bax，XIAP，cleavedcaspase一3，一9，PTEN andthephosphorylatedAktofBxPC一3cells weredeterminedrespectivelybyCellCountingKit8 (CCK一8)assay，floweytometry，andwesternblottingassay．Results Thymoqui— nonedose—de