超声波直接转导外源基因转化八棱海棠的技术研究.pdfVIP

南京农业大学学报2007，30(3)：42—46 JouⅢlojN州咖A咖uhur越U幽日s时 超声波直接转导外源基因转化八棱海棠的技术研究 丛郁1，渠慎春1。乔玉山1，姚泉洪2，章镇“ (1，南京农业大学园艺学院，江苏南京210095； 2．上海市农业遗传重点实验室／上海市农业科学院生物技术研究中心，上海201106) 摘要：应用超声波直接转导法．对八棱海棠进行耐c基因转化，同时，利用gW基因瞬间表达的方法研究了超声波处理 数)时，用80w功率处理20min，能够获得最佳的转化效果。在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片，共 得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗，转化率为1．85％。Gus染色、PcR及‰t}lem bld畸ng检测结果显示，有8个八 棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源mfc基因。 关键词：八棱海棠；超声波转化；rofc基因 中围分类号：s603．6 文就标识码：A 文章编号：1000一加30(2007)03—0042一05 of onmethodultrasoIlic-directedtransformationof Study 肘矗觑s，D6s缸Rehd． coNG zhenl． Yul，QUshen-chunl，QIAoYu—shaIll，YAoQLlan-honf，zHANG 0f (1．coll。geHonicultu陀。NanjjllgA酣c11lm豫luniven时，№njillg210095，chi册；2．shang}laiKeyL丑bomtory of ralGeneIicsa11d 0f A鲥cultu Bre出|∥A印-bjotech加lo鼎R鹪earchc朗ter，sh肌gIIaiAcademy A州clIInl耐sciences，sh帅gh且i201106，china) Ak山懈I：朋0出Ⅱm6时船Rehd．w蚰岫BfomlatedWithmfC llltm80Ilic．direetedt舢f抽mation geneby influencedt|-e砸m8fom诅tion treatment e岱ciency，Buch鼬蚰血蛆60n theDMs()in time，唧r舭d Gus in8tam resL|lbdemonshtedtllattlle illv∞tigatedby e。p嗍jon．ne h髓tment Btaini“g optimum w鹪帅w，加minut憾蛐d under 5％DMSO．zL晰leav髓we坤嘶f咖ted 237陀si8tantcallu8and9廊iBt蛐tbud臣 t}le叩timum骶atmentcondition，山en wem r船i砒蚰t obtained(h锄甜抽mationratel，85％)．AIIlon#tIle9 buds，8嘲i8忸nlbud8we陀vednedt0be咖Bfhm帅协h Gus been into 0f stailliIIg，PcR蛐pl