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中国知网学生登陆 近来要写个论文,需要下载一些参考文献,但是在中国知网,万方,维普等文献检索网站上只能查看论文摘要,无法下载全文,怎么办呢,于是就开始了百度论文免费全文下载方法的艰苦历程,终于有所收获,找到了一些方法,但是这些方法大部分都已经失效了,无法使用。不过,最终还是让我找到了一个比较好的工具,通过这个工具可以很方便的下载论文全文,解决了中国知网学生登陆的问题。 下面就为大家介绍一下这个方法,亲测可用。 其实也很简单 首先,下载一个软件,软件地址: /soft/detail/39244.html 或者:/ 此软件为绿色软件,下载后不用安装,直接解压缩打开 文献检索浏览器。 下图是软件界面: 里面有大量的中英文数据库可供大家使用,下面以知网为例给大家做个演示,其它数据库的使用方法与此类似,首先打开知网数据库 选择一个入口 输入搜索词,搜索 点击标题下载 是不是很简单啊,中国知网学生登陆的问题是不是就这样很简单的解决了啊? 这个文献检索浏览器不仅有中国知网免费入口,还有万方,维普,龙源,读秀等数据库的免费入口。 那么问题来了,这个浏览器可以免费使用吗,答案是不能免费使用。 不过注册费用很低,不过就是一瓶饮料钱,不过我认为和大家东奔西走花费很大的精力自己去寻找这些免费入口比起来,简直是太划算了。 好了,下面大家可以测试检索一下下面这篇示例文章,看看是否好用。 Thermolysin家族金属蛋白酶的适冷机制及深海适冷菌Pseudoalteromonas sp.SM9913对有机氮的降解--《山东大学》2009年博士论文 一、Thermolysin家族金属蛋白酶的适冷机制 适冷酶由生存于永久低温环境(如深海、极地和高山地区等)的生物所生产,兼有低温下高的催化效率和高温下的热不稳定性双重特点。虽然对适冷酶的适冷机制有着不同的解释,但目前最流行的解释是,适冷酶在低温下高的催化效率来自于高的酶蛋白柔性,而高的蛋白柔性则源于适冷酶的热不稳定性。但是,这一解释仍有局限性,因为,目前有报道发现适冷酶可以同时具有高的活性和高的热稳定性。在实验室内通过定向进化对酶分子的改造实验也证实,有些情况下,少数氨基酸残基的突变也可以产生同时具备高催化活性和高热稳定性的酶。因此,适冷酶的适冷机制以及适冷的结构基础有待进一步研究。 嗜热菌蛋白酶家族(thermolysin family,也称M4 family)中的金属蛋白酶多来源于细菌,其中的典型代表有来自嗜热菌Bacillus thermoproteolyticus的嗜热thermolysin和来自Pseudomonas aeruginosa PAO1的中温pseudolysin,以及来自南极细菌643的(适冷)vibriolysin(VAB)。VAB是目前所知的M4家族中唯一来源于永久低温环境的蛋白酶,但是目前关于VAB的信息仅有NCBI公共数据库中的核酸序列(AF272770)和预测的氨基酸序列(AAF78076),对于其来源菌643的生理特征以及VAB的生化性质并没有任何报道。因此,发现Thermolysin家族的(新的)适冷酶并对其性质进行系统研究,对于提高对蛋白质结构—功能之间的关系的认识,以及对蛋白酶温度(低温)适应进化规律的认识具有重要意义。 适冷菌Pseudoalteromonas sp.SM9913是分离自深海沉积物的一株γ-proteobacterium。P.sp.SM9913能够分泌大量蛋白酶,MCP-02是P.sp.SM9913分泌的一种金属蛋白酶。MCP-02的N端序列与VAB具有很高的同源性(identity为95%),北极海冰细菌P.sp.SM495所分泌的胞外酶E495的N端序列也与VAB具有很高的同源性(identity为93%),表明这两种酶都很可能属于Thermolysin家族。本论文选用金属蛋白酶MCP-02和E495为研究对象,对它们进行了基因克隆和表达、性质研究和序列与结构分析,并以中温的pseudolysin为对照,研究了MCP-02和E495的适冷机制。取得了如下研究结果: (一)深海来源和北极海冰来源的Thermolysin家族的新型蛋白酶的基因克隆与表达及其生化和酶学性质研究。 (1)深海适冷菌P.sp.SM9913所产胞外金属蛋白酶MCP-02的研究。 本论文通过使用巢式PCR和TAIL PCR等技术手段,克隆了深海适冷菌P.sp.SM9913所产胞外金属蛋白酶MCP-02的全基因序列。mcp-02基因全长2184 bp,编码含有727个氨基酸残基的蛋白酶前体。基因序列已提交GenBank,序列号为EF029091(核酸序列),ABL06977(氨基酸序列)。序列分析表明,MCP-02为Zn金属蛋白酶,属于Thermol

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