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抗球蛋白试验.ppt
抗球蛋白试验 1908年,Moreschi首先描述。 1945年,Coombs、Mourant和 Race建立了抗球蛋白试验方法。 抗球蛋白试验原理 抗体是一种球蛋白,球蛋白本身又是很好的 抗原,用人球蛋白免疫兔子使之产生抗人球蛋白 抗体,免疫性抗人球蛋白抗体与人体球蛋白可以 特异性结合。 当免疫性抗体与相应红细胞结合时只能致敏 红细胞而不能使红细胞之间产生凝集,当加入抗 人球蛋白抗体后,抗人球蛋白抗体与人球蛋白抗 体结合,即抗人球蛋白抗体在人球蛋白抗体之间 搭桥,从而使致敏红细胞产生凝集反应。 抗球蛋白法检测IgG抗体的原理 直接抗球蛋白试验(DAT) 直接抗球蛋白试验是检查红细胞表面是否 有不完全抗体覆盖的一种试验,是用抗球蛋白 血清对洗尽血浆蛋白的红细胞进行试验,如红 细胞在体内已被不完全抗体覆盖,则发生凝集 反应。 直抗试验检查对象 新生儿溶血病患儿的红细胞 溶血性输血反应者的红细胞 自身免疫溶血性贫血患者的红细胞 间接抗球蛋白试验(IAT) 用于检测红细胞在体外是否致敏的一种试 验,即通过抗球蛋白试剂用已知的抗原检测未 知IgG类抗体的特异性或用已知特异性的IgG类 抗体检测未知的抗原特异性 间抗试验的检查对象 输血反应 交叉配血 抗体筛选 抗体鉴定 抗原检测 放散液抗体检测 抗球蛋白试剂 多特异性抗球蛋白试剂 含抗IgG和抗C3d 单特异性抗IgG 无抗补体C3成分 单特异性抗C3 无抗IgG成分 抗球蛋白试验的三个阶段 第一阶段:致敏和包被 37℃水浴,使血清中的抗体结合到红细胞上 第二阶段:洗涤 用盐水洗涤,去除未包被在红细胞上的各种球蛋白。 第三阶段:加入抗球蛋白试剂 如果红细胞上包被有IgG抗体或C3加入抗球蛋白试剂会发生凝集,否则不会凝集。 抗球蛋白试验注意事项 假如红细胞上的血清蛋白未被洗净,剩余的游离球蛋白可以中和加入的抗球蛋白抗体,产生假阴性抗球蛋白试验结果。 若为阴性结果,再加1滴2~5%IgG抗体致敏的质控红细胞,离心观察结果,如凝集,表明阴性结果是正确的;如不凝集,则阴性结果不可靠。 * * 抗球蛋白可以和IgG反应 通过搭桥作用使红细胞凝集 * *
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