实验四RNA的细胞化学.pptVIP

作业 1 简述实验的原理 2 绘图示实验结果 3 你还能设计新的对照实验吗？ DNA和RNA的细胞化学 Brachet反应 实验原理 甲基绿—派洛宁（Methyl green-Pyronin）为碱性染料，它能分别与细胞内的DNA、RNA结合而呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时，甲基绿和染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色，但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色。即RNA对派洛宁亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成蓝绿色。 实验准备 （一）器材 　　 显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸 （二）材料 　　 洋葱鳞茎表皮 （三）试剂 　　 1．Unna试剂：甲基绿—派洛宁（Methyl green-Pyronin）染色液 　　 配制注意事项： 　　 （1）Pyronin可加热助溶。 　　 （2）Methyl green批号不同，染色效果差别很大。商品Methyl green常混有甲基紫，影响染色效果，应先把药品放在分液漏斗中，加入足量的氯仿，用力振荡，然后静置，直到洗脱甲基紫为止，最后干燥备用。 【方法与步骤】 1．用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块，置于载玻片上。 2．滴一滴Unna试剂，染色30min。 3．蒸馏水洗两次，吸水纸吸去多余的水分 4．盖上盖玻片，镜检。 对照片： 　　撕取洋葱鳞茎内表皮，经5%三氯醋酸中90℃水浴处理15min 。再经70%乙醇洗片刻，然后按步骤 2-4制片观察。 　　 实验预期结果