猪肺炎支原体套式PCR检测方法的建立及应用.pdfVIP

( ) ( ) 9 1 江苏农业学报 J iangsu J. of A g r. S ci. , 20 10 , 26 1 : 9 1～95 逯晓敏 ,冯志新 ,刘茂军 ,等. 猪肺炎支原体套式 PCR 检测方法的建立及应用 [ J ]. 江苏农业学报 , 20 10, 26 ( 1) : 9195. 猪肺炎支原体套式 PCR检测方法的建立及应用 1, 2 1 1 1 1 2 1 逯晓敏 , 　冯志新 , 　刘茂军 , 　吴叙苏 , 　甘 　源 , 　张 　映 , 　邵国青 ( 1. 江苏省农业科学院兽医研究所 ,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 , 国家兽用生物制品工程技术研究中心 ,江苏 南京 2 10014; 2. 山西农业大学动物科技学院 ,山西 太谷 030801) ( ) 　　摘要 : 　根据 GenB ank 中登录的猪肺炎支原体 P36 L 乳酸脱氢酶 全基因序列 ,设计合成了 2 对引物 ,建立套 式 PCR 方法 。运用该方法对猪肺炎支原体不同菌株培养物进行了扩增 ,并对经肺内免疫猪支原体肺炎活疫苗后支 气管肺泡灌洗液进行了检测 。结果表明 ,不同菌种均能扩增出 427 bp 的目的条带 ,而其他病原菌未出现特异性扩 ( ) 增条带 。建立的套式 PCR 方法检测猪肺炎支原体的最低检测限度为 10 个 CCU 颜色变化单位 。支气管肺泡灌 洗液检测结果表明 ,经肺内免疫的猪支气管肺泡灌洗液扩增结果均为阳性 。 关键词 : 　猪肺炎支原体 ; P36; 套式 PCR 中图分类号 : 　S858. 282. 62　　　文献标识码 : 　A 　　　文章编号 : (2010) 0 1009 105 Establishm en t of A Nested PCR A ssay for D etection of M ycop lasm a hyo pn eum on iae 1, 2 1 1 1 1 2 1 LU Xiaom in , 　FEN G Zhixin , 　L IU Maojun , 　WU Xusu , 　GAN Yuan , 　ZHANG Ying , 　SHAO Guoqing ( 1. Institu te of Veterina ry M ed icine, J iangsu A cadem y of A g ricu ltu ra l S ciences, Key L abora tory of A n im a l D iseases D iag nostic and Imm unology, M in istry of A g ricu ltu re, N a tiona l Cen ter f or E ng ineering R esea rch of Veterina ry B iop roducts, N anj ing 2