复习基因工程q.ppt

[高考回想] 1. 下列关于基因工程的叙述，正确的是: A.基因工程往往以细菌抗药性基因为目的基因 B.重组DNA的形成和扩增是在细胞内完成的 C.基因工程育种能够定向地改造生物性状，快速形成新物种 D.限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组DNA必需的工具酶 * （2009年浙江卷）3．下列关于基因工程的叙述，错误的是（ ） A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 D （2010年浙江卷）2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ） A 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C 将重组DNA分子导入原生质体 D 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 （2010年浙江卷）30．苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白能使螟虫死亡。研究人员将表达这种毒蛋白的抗螟虫基因转入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因组中，培育出一批转基因抗螟水稻。请回答： …… A （2011年浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 三维P178 （2011年浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 蛛丝基因 同种限制性核酸内切酶 DNA连接酶 思考：如何形成重组DNA分子？ 绿色荧光蛋白基因的载体 限制性核酸内切酶 重组DNA （2011年浙江卷）将 ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（ ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 C ◎ [猜想2012] 我省科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝。并首次在世界上通过转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组序列中，并在受体细胞中成功表达高强韧性的蚕丝。 问题1、在这项“基因工程”的操作中，目的基因是？获得目的基因的常用方法有？ 2、采用绿色荧光蛋白基因的主要目的是？形成重组DNA分子的过程中需要用到的酶是？ 3、在这项“基因工程”的操作中，受体细胞是？ 作为标记基因 拖牵丝基因 蚕的受精卵 化学方法合成目的基因 聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因 建立基因文库，从基因文库中获取目的基因 ◇若蛛丝基因序列已知： ◇若蛛丝基因序列未知： 获得蛛丝基因方法： ◎ [猜想2012] 我省科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝。并首次在世界上通过转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组序列中，并在受体细胞中成功表达高强韧性的蚕丝。请同学构建含“蛛丝基因”的转基因蚕的基本步骤。 1、获得目的基因(蛛丝基因)； 2、形成重组DNA分子 (“绿色荧光蛋白基因” +“蛛丝基因”+载体)； 3、将重组DNA分子导入受体细胞(蚕的受精卵)； 4、筛选含有目的基因的受体细胞； 5、目的基因(蛛丝基因)的表达。 蛛丝基因 同种限制性核酸内切酶 DNA连接酶 思考：如何形成重组DNA分子？ 绿色荧光蛋白基因的载体 限制性核酸内切酶 重组DNA 一、基因工程的基本步骤 问题探讨：1、基因工程的操作水平是？ 2、基因工程的技术保障是？ 3、下列叙述是否正确？为什么？ （1）限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC，只能在G和A之间切断DNA？ （2）DNA连接酶能够将任意2个DNA片段通过碱基粘合？ 1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶 ⑵特点： ⑴作用： ⑶所作用的化学键： 特异性（识别特定核苷酸序列，切割特定切点） 识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子