人体血清中25种元素ICP测定.docVIP

人体血清中25种元素ICP-MS法检测作者：高飞1，2，张剑峰1，王德才2，孙长颢2????作者单位：1.黑龙江省疾病预防控制中心公共卫生检验所，哈尔滨 150030; 2.哈尔滨医科大学公共卫生学院  【关键词】? 电感耦合等离子体谱(ICP-MS);人体血清;元素 元素与人体健康关系是当今生命科学研究中重要领域，元素的缺失和富集可以引起多种疾病〔1〕。了解其分布情况并进行有针对性的调节，可以达到缓解和避免由元素分布失衡而引起的疾病。目前此类检测方法主要有原子吸收光谱法和原子荧光分光度计法等，这些方法存在检验元素种类较少和一次只能分析1～2种元素等缺点〔2,3〕。为了达到快速检测人体内多种元素含量的目的，本研究建立了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定人体血清中Be、Na、Mg、Al、K、Ca、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Zn、Cu、As、Se、Mo、Ag、Cd、Sb、Ba、T1、Pb、Th、U 25种元素的方法，此方法简便快捷，结果准确。现将结果报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 试剂与标准溶液 浓硝酸：68%，优级纯;混合标准贮备液：10.0 μg/ml Al、Mn、Cu、Zn、As、Cd、Cr、Pb、Se、Sb、Ba、Be、Mo、Ni、Ag、T1、Co、V、U、Th;l.0 mg/ml K、Na、Ca、Mg、Fe;调谐液：10 ng/ml Li、Y、Ce、T1、Co;内标溶液：10 μg/ml Li、Sc、Ge、In、Bi(均为美国Agilent公司);超纯水：电阻率18.2 MΩ·cm。 　　1.2 仪器 7500a型电感耦合等离子体质谱(美国Agilent公司);MARSX型高压微波消解仪(美国CEM公司);超纯水机PL5241型超纯水处理系统(美国PALL公司)。 　　1.3 仪器工作条件及优化 高频发生器(RF)功率：1 350 W;载气流速：1.11 L/min;采样深度：8 mm;雾化器温度：2 ;蠕动泵转速：0.1 r/s;样品提升速度：0.50 r/s;重复次数：3次。在预实验中，以高频发生器(RF)功率、载气流速、采样深度等主要仪器指标作为变量，用正交法优化各仪器参数〔4〕，使仪器的灵敏度、氧化物、双电荷、分辨率等各项指标至最佳测定条件。 　　1.4 实验方法 以哈尔滨医科大学健康体检中心无肝、肾疾病史的60名健康人为研究对象，年龄32～72岁。取1.0 ml血清经高压微波消解处理，按照1.3条件进行测定，同时做空白实验，用外标校正标准曲线法定量，用内标校正基体干扰和漂移。 　　1.5 干扰的消除 本研究通过优化仪器条件和选择合适的干扰校正方程来校正由氧化物、双电荷、质量歧视等所带来的正质谱干扰。非质谱干扰主要来源于样品基体，由于血清样品和标准物质在黏度、电离平衡、传输效率等方面有一定差异，且血清样品中含有大量的蛋白质、无机盐和有机物，其中钠盐含量很高，因此，基体干扰不可忽视。本方法选用6Li、45Sc、72Ge、115In、209Bi作为内标元素对分析信号进行校正，以有效地克服信号漂移，消除一定的基体干扰，提高实验数据可信度。血清样品基体较为复杂，常加入双氧水辅助浓硝酸消化〔3〕。为达到血清样品消化彻底且最大限度降低试剂所带来污染的目的，本方法采用浓硝酸消化样品，通过适当延长消化时间，不仅满足了实验要求，同时还降低了试剂所带来的基体干扰。 　　2 结 果 　　2.1 检出限、曲线相关系数和线性范围 本研究在避开同质异位素和氧化物等多原子离子干扰的前提下，选择各元素最高丰度的同位素进行测定，25种元素检出限在0.000 1～6.0 μg/L，相关系数均0.999 5。 　　2.2 加标回收率和精密度实验(表1) 随机取健康人血清样品1份，分别加入一量的标准液，浓度为1 μg/L(元素加标浓度为100 μg/L)和5 μg/L(元素加标浓度为500 μg/L)。由于人体血清中Na、Cu、Zn元素含量较高，对其进行单独加标，Na加标浓度为10和50 mg/L，Cu、Zn加标浓度为100和500 μg/L，连续测定6次，计算精密度和加标回收率。结果显示，除Be和V 2种元素的加标回收率偏低以外，其余元素的加标回收率在90.97%～113.63%，相对标准偏差(RSD)均在0.48%～6.93%。表1 血清样品加标回收率及精密 　　2.3 血清样品测定结果分析(表2) 对60份健康人血清样品进行分析，其中Be、Al、Ag、Sb、U为未检出元素。表2 血清样品中元素含量测定结果 　　2.4 质控样品分析 选择国家标准人血清无机成分分析标准物质(GBW09135)中Na、Mg、Cu元素作为质控标准，标准参考值为(3.12±0.13)g/L、(20.4±0.8)mg/L、(1.05±0.09)