小麦与玉米中生物毒素免疫层析快速定量方法的验证及与国家标准方法的比较-农产品质量与安全-李为喜.pdfVIP

小麦和玉米中生物毒素免疫层析快速定量 方法的验证及与国家标准方法的比较木 李为喜 张妍孙娟 王步军 (中国农业科学院作物科学研究所，农业部谷物品质监督检验测试中心，农业部谷物产品质量安全风险评 估实验室(北京)，北京100081) 摘要：本文验证了应用免疫层析技术测定小麦、玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和赭曲 了一般化学分析方法的要求，此外，该方法具备易于操作、仪器便于携带、操作快速、检测定量化、灵敏准确、重现性好等 优点，不仅适用于小麦、玉米农产品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A等生物毒素的现场检测。而且 非常适用于我国县级、乡镇级农产品质量安全检测站开展小麦和玉米生物毒素的快速定性、定量筛查工作。 关键词：小麦；玉米；脱氧雪腐镰刀菌烯醇：玉米赤霉烯酮；赭曲霉毒素A；免疫层析快速定量法 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalen01． DON)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)和赭 曲霉毒素A(OchratoxinA。OTA)。是由镰刀菌、 赭曲霉菌等真菌分泌产生的代谢产物．主要污染小 麦、玉米等谷物产品。研究结果表明，食用DON 用免疫亲和柱净化。用高效液相色谱仪(HPLC) 污染的食物可导致人畜呕吐、腹泻等疾病【·~2】， 或荧光分光光度计进行定量检测。生物毒素国家标 ZEN具有一定类雌激素作用．可能与性早熟和宫 准测定方法的共同点是：样品前处理过程中亲和柱 颈癌变有关[31，OTA可导致人和动物肾癌，已被国 净化时间长，成本高；最后定量过程需要HPLC精 际症研究所列为人类二级致癌物【4】。 密仪器。仪器昂贵。操作过程复杂、时间长。这些 近年来，小麦、玉米中DON、ZEN、OTA的方法无法满足现场检测的需要，同时不易被县、乡 污染问题受到广泛关注。对其监管受到广泛重视。 等基层小型实验室的检测人员所掌握和应用。近年 世界上许多国家、国际和地区性组织如食品法典委 来．国内外对生物毒素快速测定方法的研究方兴未 员会、欧盟先后制定了此3种毒素限量标准【5吲。 艾．国内已有报道应用免疫层析法快速检测植物油 我国于2011年4月修订并颁布了食品安全国家标中的黄曲霉毒素【l习及玉米赤霉烯酮【13】等方面的研 准．规定了DON、ZEN和oTA在小麦和玉米中的究。本研究旨在验证免疫层析法快速、定量检测小 最高限量分别为1000 p,g／kg、60p．g／kg和5斗g／l(妒。 目前检测小麦、玉米等食用农产品中的DON、 性．并将该方法与现行的国家标准方法进行了比 ·基金项目：2012年全国谷物产品质量安全普查和风险监测项目资助。 作者简介：李为喜(1975-- 王步军(1960一 )，研究员，从事农产品质量与食物安全工作。E—mail：wangbujun@caas，cn(通讯作者)。 万方数据 对，力图为开展小麦、玉米农产品现场检测，同时 提取液甲醇+水(70+30，VⅣ)，用多功能旋转混 也为县、乡镇级农产品质量安全检测站等基层实验 合器混合10 min(或者用手剧烈振荡3min)．用 室开展生物毒素检测找到一种科学、简便、适用的 中速定性滤纸过滤．收集全部滤液。(2)免疫层析 检测方法。 法快速定量检测：前期操作方法同DON的试验方 法。该方法的定量限为30 i乩g／kg，线性范围为 30～500 一、试验材料和方法 I上g／kg，当测定值为500斗g／kg时，需要将 (一)试剂和材料iChe