第4章 病毒的遗传分析.pptVIP

第四章 病毒的遗传分析 第四章 病毒的遗传分析 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 第二节 噬菌体突变的重组实验 第三节 噬菌体突变的互补测验 第四节 噬菌体的缺失作图 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 一、噬菌体的一般结构 二、噬菌体的繁殖 三、噬菌体的突变型 一、噬菌体的一般结构 一、噬菌体的一般结构…2 二、噬菌体的繁殖 1．烈性噬菌体（virulent phages） 二、噬菌体的繁殖 2．温和型噬菌体（temperate phage） (1)裂解途径：和烈性噬菌体相同 (2)溶源途径： 二、噬菌体的繁殖 2．温和型噬菌体：具有裂解和溶源两种途径 二、噬菌体的繁殖 2．温和型噬菌体具有裂解和溶源两种途径 二、噬菌体的繁殖 3．溶源性： 带有某种噬菌体，但并不立即导致溶菌的现象称为溶源性 具有溶源性的细菌称为溶源性细菌（lysogenic bacteria） 受温和噬菌体感染的细菌，几乎都成为溶源菌。 在细菌中处于潜伏状态的噬菌体称为原噬菌体(prophage) 带有原噬菌体的细菌称溶源性细菌(lysogenic bacterium)失去原噬菌体的细菌为非溶源性细菌(non-lysogenic bacterium) 二、噬菌体的繁殖 3．溶源性： 溶源性细菌有两个重要特性: (1)免疫性： 原噬菌体产生一种阴遏蛋白，抑制同类噬菌体DNA的复制，因而能抵抗同类噬菌体的超感染。 (2)可诱导性： 自发: 万分之一； 紫外线或丝裂霉素: 90%。 三、噬菌体的突变型 1、快速溶菌突变体 (1)野生型r+形成小的噬菌斑1mm，周边有朦胧的光环 (2)快速溶菌突变体 r（rapid lysis）形成大的噬菌斑2mm，边缘清晰。 (3)溶菌阻碍现象 (4)鉴别：噬菌斑大小 三、噬菌体的突变型 2、寄主范围突变体 (1)野生型h+ : 能感染野生型的大肠杆菌Ttos，（sensitive）  但不能感染Ttor， （resistant） (2)突变型h: 对Ttos和Ttor 都能感染 (3)鉴别 ：混合Ttor和Ttos 野生型h+出现混浊噬菌斑，突变型出现清亮噬菌斑 三、噬菌体的突变型 3、条件致死突变体 在某些条件下，这些突变型是致死的，而在另一些条件下仍可进行繁殖 限制条件(restrictive condition) 许可条件(permissive condition) 在许可条件下繁殖突变型，在限制条件下研究突变基因在发育过程中的效应 三、噬菌体的突变型 … 3、条件致死突变体 （1）“温度敏感”突变(temperature sensitive mutation) ①热敏感突变型(heat sensitive mutants，ts)： 通常在30℃(许可条件)感染宿主进行繁殖，但在40一42℃(限制条件)条件下就是致死的 ②冷敏感突变型(cold sensitive mutation，cs)： 在较低温度下就是致死的 原因：基因突变后所编码的蛋白质中有一个氨基酸的替换，而这种蛋白质在“限制温度”下不稳定而丧失活性 三、噬菌体的突变型 … 3、条件致死突变体 （2）抑制因子敏感突变(suppressor-sensitive mutation, sus) 实质：正常的密码子变成了终止密码子，因而翻译提前终止，不能形成完整肽链 属于无义突变（nonsence mautation） 带有sus突变的噬菌体在感染带有抑制基因(suppressor, su＋)(许可条件)的宿主菌时能产生子代，但在感染没有抑制基因(su－)(限制条件)的宿主菌时不能产生子代 注意：sus突变与“宿主范围突变” 的区别 三、噬菌体的突变型 … 3、条件致死突变体 sus突变分为三类 三、噬菌体的突变型 … 3、条件致死突变体 无义抑制基因（su＋）实质： tRNA基因发生了突变 举例：琥珀型抑制基因‘su3＋’ 第二节 噬菌体突变型的重组实验 一、T2突变型的两点测交 二、T4突变型的三点测交 三、ΦX174突变型的二点、三点测交 四、烈性噬菌体的遗传体制 五、S.Benzer重组测验 一、T2突变型的两点测交 一、T2突变型的两点测交 [实例]不同的快速溶菌突变型，在表型上也不相同，记作ra，rb，rc。确定4个基因ra，rb，rc，h的连锁图。 用不同快速溶菌突变型rxh+与宿主范围突变型r+h-杂交，结果见表: 一、T2突变型的两点测交[实例]根据每一杂交作一连锁图： 4个基因的连锁关系有4种可能 ： 图示 一、T2突变型的两点测交[实例] 进行rcrb+×rc+rb, 把得到的重组值与rb—h比较, 知rc－rbrb－h， 所以排列顺序 rc－h－rb 二、