携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因表达.docVIP

携带低氧诱导因子1α慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞后成骨基因的表达 付志杰1，2，张巨峰1，2，3，王大平1，2，3，陈洁琳1，2，3，段? 莉1，2，3，何美建1，2，李庆庆1，2，李文翠1，2，熊建义1，2，3 1汕头大学医学院深圳二院临床学院，广东省深圳市? 518035；2深圳市第二人民医院骨科，广东省深圳市? 518035；3深圳市组织工程重点实验室，广东省深圳市? 518035 Expression of osteogenic genes in rat bone marrow mesenchymal stem cells infected by lentivirus carrying hypoxia-inducible factor-1 alpha? Fu Zhi-jie 1, 2, Zhang Ju-feng 1, 2, 3, Wang Da-ping 1, 2, 3, Chen Jie-lin 1, 2, 3, Duan Li 1, 2, 3, He Mei-jian 1, 2, Li Qing-qing 1, 2, Li Wen-cui 1, 2, Xiong Jian-yi 1, 2, 3 1 Shenzhen Second Hospital Clinical School of Shantou University Medical College, Shenzhen 518035, Guangdong Province, China; 2 Department of Orthopedics, Shenzhen Second People’s Hospital, Shenzhen 518035, Guangdong Province, China; 3 Shenzhen Key Laboratory of Tissue Engineering, Shenzhen 518035, Guangdong Province, China 摘要? 背景：人低氧诱导因子1α可调控其下游成骨及成血管基因的表达，具有提高成骨活性的作用。目的：观察携带人低氧诱导因子1α慢病毒感染的大鼠骨髓间充质干细胞中成骨基因表达情况。方法：通过RT-PCR方法从Hela细胞中获得低氧诱导因子1α，构建携带低氧诱导因子1α的慢病毒表达质粒Lenti-HIF-1α-eGFP，与LentiPac HIV混合包装质粒共包装293Ta细胞，获得病毒；采用全骨髓直接贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞，使用流式细胞仪对骨髓间充质干细胞进行鉴定。分别在慢病毒感染骨髓间充质干细胞1，4，7，14 d后，用实时荧光定量PCR检测骨髓间充质干细胞中成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶的表达水平。结果与结论：Lenti-HIF-1α-eGFP有效地感染骨髓间充质干细胞，实时荧光定量PCR检测结果显示成骨基因骨形态发生蛋白2、骨钙蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶在Lenti-HIF-1α-eGFP感染后第4天开始明显过表达，且持续至14 d。结果表明低氧诱导因子1α可以提高骨髓间充质干细胞的成骨活性。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程 全文链接： 窗体顶端 关键词 ： 干细胞； 骨髓干细胞； 低氧诱导因子1α； 骨髓间充质干细胞； 基因转染； 骨缺损； 慢病毒载体； 骨组织工程； 成骨基因； 成骨活性； 广东省自然科学基金； ?? Abstract： BACKGROUND: Human hypoxia-inducible factor-1 alpha can regulate the expression of osteogenic and angiogenic genes, and promote osteogenic activity.OBJECTIVE: To observe the expression of osteogenic genes in rat bone marrow mesenchymal stem cells carrying human hypoxia-inducible factor-1 alpha slow virus infection. METHODS: Hypoxia-inducible factor-1 alpha was obtained from Hela cells using RT-PCR. Lentivirus expression vector plasmid carrying hypoxia-inducible factor-1 alpha (L