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DOI :10.13200/ki.cjb.000229 网络出版时间:2014-03-25 14:15
网络出版地址:/kcms/doi/10.13200/ki.cjb.000229.html
中国生物制品学杂志2014 年3 月第27 卷第3 期 Chin J Biologicals March 2014,Vol. 27 No. 3 4 15
技术方法
改良组织块贴壁法制备人脐带间充质干细胞
1 2 3 1 1 4
贾宇臣 ,赵凯 ,马秀梅 ,陈琦 ,王利 ,白瑞霞
, ,
1. 内蒙古医科大学分子生物学研究 心 内蒙古 呼和浩特0 10059 ;2. 内蒙古呼和浩特市第一医院儿内科 内蒙古
呼和浩特0 10010;3. 内蒙古医科大学基础医学院病理学教研室,内蒙古 呼和浩特0 10 110;
,
4. 内蒙古自治区人民医院检验科 内蒙古 呼和浩特 010017
摘要:目的 采用改良组织块贴壁法制备人脐带间充质干细胞 human umbilical cord mesenchymal stem cells ,hUCMSCs)。
方法 无菌条件下取足月婴儿脐带,采用改良组织块贴壁法分离间充质干细胞,台盼蓝染色法计数单个核细胞数,倒
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置相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及免疫表型。结果 原代hUCMSCs 的数量为 1 耀 5 )伊 10
个。培养至8 d ,组织块边缘处有单细胞爬出;培养至2 周,贴壁生长的细胞散在分布或形成小克隆;培养至20 d ,细
胞呈梭型、三角形或多角形。培养第20 天的原代hUCMSCs 的G G 期细胞占88. 12%,S 期细胞占1. 23% ,G M 期
0 1 2
细胞占10. 65% ,大多数细胞处于细胞增殖的潜伏期,CD105 阳性率为97. 65% ,CD34 阳性率为2. 54% 。结论 采用
改良组织块贴壁法分离了hUCMSCs ,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,为其临床应用奠定了基础。
关键词:脐带;间充质干细胞;组织块贴壁法
中图分类号:Q2鄄33 R392鄄33 文献标识码:A 文章编号:1004鄄5503 2014)03鄄04 15鄄04
Preparation of human umbilical cord mesenchy
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