1株多重耐药的金黄色葡萄球菌的分离与鉴定.pdfVIP

～ 6一 养禽与禽病防治 2011年第3期 摘要：2009年4月，广东省一养殖场的肉鸡发生一起病例 ，临床症状表现为 腹泻，胸腹部、翅内侧等处羽毛脱落，皮肤紫红色或破溃，皮下浸润出血。通过临 床症状、病理变化观察和实验室诊断，确诊为金黄色葡萄球菌感染。对该分离菌株 做药敏试验，发现其耐药性强。动物试验表明，该分离菌对雏鸡具有高度致病性。 关键词：鸡 金黄色葡萄球菌病 耐药性 葡萄球菌病是由金黄色葡萄球菌或其他葡萄球菌引起的多种畜禽共患的一种 急性败血性传染病 ，一般认为金黄色葡萄球菌是主要的致病菌。鸡金黄色葡萄球 菌病是一种多发、易发的禽病，尤其现在的禽类养殖多采用集约化方式，接触、摩 擦 、蹬踩及消毒不彻底都易引发此病 lJ【。金黄色葡萄球菌引起的严重感染的发病率 在全球范围内迅速增加，由于该菌对抗菌药物的交叉耐药十分严重，给临床治疗 造成了极大的困难 ，应受到广泛的关注口卅。2009年4月，广东省某鸡场发生一起 以胸腹部 、翅内侧等处羽毛脱落，皮肤呈紫红色’、破溃为主要临床特征的疾病，病 ． 鸡精神沉郁，食欲减退 ，灰白色或黄绿色水样下痢。该养户一批鸡苗于36日龄开始 由出现零星死亡，之后死亡率高达9％。采集病鸡肝脏及心血病料，经细菌分离鉴 定，确诊为金黄色葡萄球菌感染。该病发病急，潜伏期短，1 3天即发病死亡。对 亏该菌株做了2O种药物的药敏试验，发现其耐药性很强。 1 材料与方法 1．1 病理变化及病料采集 文 发病鸡剖检可见皮下充血，胸腹部有散在出血斑；脾、肝脏肿大，有灰黄色坏 死灶；心包发黄，内有混浊的渗出液；大肠后段发炎 ，肠腔内充满深红色血块。无 菌操作采集病鸡肝脏及心血病料。 ：1．2 主要试剂 1．2．1 培养基及生化试剂：普通营养琼脂培养基、绵羊血和三糖铁琼脂培养基， 摹葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇细菌生化微量鉴定管，均为杭州天和微生物 - g-试剂有限公司产品。 ． t．2．2 药敏纸片：林可霉素、氯霉素、利福平、强力霉素、舒普深、头孢噻肟 、头 蚕孢他定、万古霉素、头孢拉定、卡那霉素、阿米卡星、阿莫西林、阿奇霉素、氨苄西林、 磊恩诺沙星 、新霉素、氟哌酸、复方新诺明、环丙沙星和甲氧苄胺嘧啶，均为杭州天 和微生物试剂有限公司产品。 三 1．3 实验动物 辜 10日龄健康雏鸡由广东省农业科学院畜牧研究所提供。 墨 1．4 细菌分离培养 I 取病料无菌操作划线接种于普通琼脂平板，置温箱37℃培养24h镜检；纯化 一后划线接种于鲜血琼脂平板上，37~C培养24h，观察结果。 1．5 细菌形态观察 无菌操作挑取单菌落进行涂片，革兰氏染色镜检。 t．6 生化试验 将细菌分离物纯化后增菌培养，进行生化特性试验，生化项 目及试验方法按 文献pj进行。 1．7 药敏试验 用纸片琼脂扩散法 ，将细菌涂布到普通琼脂板 ，将贴药敏片的平板置37~C温 箱中培养 18h，取出观察结果，测量抑菌圈直径。抗菌药物药敏试验采用改良的