猪细小病毒结构蛋白VP1和VP2的基因免疫研究.pdfVIP

第 卷 第 期 病 毒 学 报 19 1 Vol.19 No.1 年 月 2 0 0 3 3 CHINESEJOURNALOFVIROLOGY MarCh 2 0 0 3 猪细小病毒结构蛋白VPl 和VP2 的基因免疫研究 赵俊龙，陈焕春，吕建强，王祥，肖少波，周复春 （华中农业大学 畜牧兽医学院，湖北 武汉 430070） 摘要：利用真核表达载体 和 （ ）分别构建了含有猪细小病毒 基因的 和含有 pCIneo CDNA3.1 +p VP1 pCIneoVP1 VP2 基因的pCIneoVP2 与pCDNAVP2 三种真核表达质粒。将上述三种真核表达质粒分别转染IBRS-2细胞，利用间接 ELISA检测表达情况，结果表明上述三种质粒均能在 IBRS-2 细胞表达，表达产物位于细胞中。在此基础上，利用 这三种质粒分别以肌内注射的方式，间隔 周 次免疫小鼠，结果发现所有表达质粒均能诱导产生明显的细胞免 2 2 疫和体液免疫，其中pCIneoVP1 质粒诱导的体液免疫最强，与猪细小病毒灭活疫苗免疫组相当，pCIneoVP2 诱导的 细胞免疫应答强于PPV灭活组，pCIneoVP1 和pCIneoVP2 联合免疫并没有加强作用。 关键词：猪细小病毒；结构蛋白；真核表达；基因免疫 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） SS52.659.2 A 1000-S721 2003 01-0047-05 猪细小病毒（ ， ）是引起初 酶及试剂盒 各种限制性内切酶， 连接酶均为宝 porCine arvovirusp PPV 2 T4DNA 产母猪发生流产，不孕，产死胎、畸形胎、木乃伊胎及 生物（大连）工程公司产品；脂质体转染试剂盒为GibaCoBRL ［］ 公司产品；细胞毒 细胞功能测定试剂盒购自 公 1 T Prome a 弱仔等的主要病原之一 。该病广泛存在于世界 g 司；淋巴细胞分离液购自北京原平皓生物技术公司。 各地并在大多数猪场流行，严重地影响着养猪业的 3 VPl 和VP2 基因真核表达载体的构建 将 VP1 基因从 发展，因此一直是猪病研究的热点之一。同其它病 pMD1S-VP1 质粒上选择合适的酶切位点克隆入 pCIneo，将 毒病的防制一样， 的防制也主要以免疫预防为 PPV VP2 基因从pMD1S-VP2 质粒上