组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素（TSA）对骨肉瘤MG-63的诱导凋亡作用及其机制研究.pdfVIP

2011年2月第49卷第5期 ·基础研究 · 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素(TSA)对骨肉瘤MG一63的诱导凋亡 作用及其机制研究 薛小云 吕 智 ·刘小丽 冯 毅 ，贾 鹏 - (1．山西医科大学临床系，山西太原030001；2．山西医科大学第二医院骨科 ，山西太原030001； 3．山西医科大学第二医院病理科 ，山西太原030001) f摘要】目的 探讨组蛋 白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)曲古抑菌素(TsA)对骨肉瘤细胞株MG一63的杀伤作用及机制。方法 以不同浓度的TSA作用于体外培养的骨肉瘤细胞 ，采用 MTF法检测细胞生长抑制率；以流式细胞技术(FCM)测不同浓度 TSA作用前后骨肉瘤细胞周期变化情况；免疫细胞化学技术观察对 Survivin基因和血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平； RT—PCR分析TSA作用前后骨肉瘤细胞内P21一 mRNA的表达变化。结果 TSA在纳摩尔浓度即可抑制细胞增殖；FCM检 测到细胞周期发生改变，G2／M期细胞较对照组增多。免疫组化结果表明，该药能明显抑制 Survivin和VEGF蛋 白的表达， RT—PCR结果表示TSA能显著诱导P21~ pmRNA表达。上述结果都有明显的量 一效关系。结论 TSA作用于GJM期并有效 诱导体外培养的骨肉瘤细胞凋亡，其诱导凋亡机制之一可能是通过抑制 Survivin和VEGF基因的表达并且上调P21蛋白水 平实现的。 [关键词】凋亡 ；曲古抑菌素；骨肉瘤细胞；细胞周期 【中图分类号】R737．31 【文献标识码】 A [文章编号】1673—9701(2011)05—07—03 M echanism of Histone Deacetylase Inhibitor Trichostatin A Induced Apoptosis in Human Osteosarcoma CellsM G-63 XUE X／aoytml l L／U X／ao／f FENG 盱 JIA Peng~ 1．ClinicalDepartment，ShanxiMedicalUniversity，Taiyuan 030001，China；2．OrthopedicsDepartment，theSecond HospitalofShanxiMedi— calUniversity，Taiyuan 030001，China；3．Pathology Department，theSecond hospitalofShanxiMedicalUniversity，Taiyuan 030001，China A【bstract】ObjeetiveToexploretheapoptosismechanism ofMG-63cellinducedbyTSA．MethodsTheM，r【rmehtodwasusedto testMG一63 cellgrowth．The cellcyclewere testby FCM．Immunochemistry were used to observe hte expression ofsurvivin gene and VEGF in MG-63 cellline aftertreated by TsA．Semi—quantitative RT—PCR wasused to detectthe mRNA expressionsofP2l ． Results MG-63 cellwere very sensitivetoTSA which inhibited hte growth ofcellin aconcen~anfion-dependentmanner．Flow cy- tometrydataindicatedthattheincreasesinhteGJM phasecellpercentageandconcomitantfallinhtepercentageofGdG1phaseceHs． By increasinghte TsA concen~afion，hteexpression ofsurvivin and VEGF decr