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初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程 继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织、芽）。 生根培养：将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程。 驯化移栽：组培苗经人工炼苗后移栽到驯化苗床上使之适应 露地或保护地条件的过程。 脱分化：也称去分化，指离体条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或不分化细胞的过程。 再分化：由脱分化形成的愈伤组织重新分化出特定细胞、组织和器官的过程。 细胞再分化指离体培养的植物细胞和组织由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株。 细胞水平的再分化 组织水平的再分化 器官水平的再分化（器官发生） 植株水平的分化（植株再生） 细胞水平的再分化：愈伤组织生长、不断分裂，分化出不同的细胞类群。主要有薄壁细胞、分生细胞、色素细胞、石细胞、纤维细胞等。 组织水平的再分化：在高水平生长素条件下，最常见的是维管束的分化。松散的愈伤组织内含大量拟分生组织或瘤状结构；致密的愈伤组织内组织分化很少，大多由高度液泡化的细胞组成。 器官水平的再分化：由分化出的不同组织形成各种器官，如芽、茎、叶、根等。 器官水平的再分化（器官发生）根据起源不同，分为两种类型：直接器官发生（器官型）和间接器官发生（器官发生型） 直接器官发生（器官型）：直接从外植体的细胞形成器官原基，然后发育成器官。 间接器官发生（器官发生型）：先形成愈伤组织，再由愈伤组织产生不同的器官原基，后形成不同器官。 植株水平的再分化（植株再生）：根、茎或芽器官的发生可使植株重建。先诱导分化出芽，后形成根较好。 离体培养中再生植株的主要途径有：器官发生和胚胎发生 胚状体：对应于种子胚而言。在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），与胚相同的结构功能相似 。 愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的、团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 愈伤组织培养形成过程（三个时期）： 诱导期（起动期）：是细胞准备分裂的时期。细胞大小几不变，内部发生生理生化变化，迅速合成蛋白质和核酸。 分裂期：外层细胞分裂，中间细胞常不分裂，形成小芯。细胞分裂快，结构疏松，缺少结构，浅而透明。在原培养基上，细胞必分化，及时转移，其可无限制地进行细胞分裂，维持不分化状态。 分化期：细胞在形态和生理功能上的分化，出现形态和功能各异的细胞。 愈伤组织的生长 （1）生长：诱导期后，外植体外层细胞分裂，在组织受伤表面形成一层愈伤组织， 细胞数目迅速增多，表层细胞平均重量下降，体积变小；降低温度，可以使细胞生长速度减慢，平均大小可增加。 （2）质地类型：松脆和致密两种。高浓度生长素，可使变得松脆；高浓度细胞分裂素，则可使致密。 愈伤组织形态发生方式：器官发生和体细胞胚胎发生 分化:指个体发育过程中，不同部位的细胞形态结构和生理功能发生改变，形成不同组织或器官。 分化：是指植物体各个部分出现异质性的现象，体现在细胞分化、组织分化、器官分化三个水平上。 细胞分化：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。是基因选择性活化或阻遏的结果。 植物组织培养技术的应用 1、优质种苗的快速无性繁殖： （1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖 （2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗：如草莓、香蕉、 甘蔗、马铃薯、大蒜等。 2、用于植物遗传育种 种质资源离体保存； 花粉花药培养产生单倍体； 胚乳培养产生三倍体； 胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍； 原生质体培养进行体细胞杂交； 植物体细胞无性系变异诱导和筛选； 用于植物基因转移操作等。 3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质 4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 植物组织培养室通常包括 洗涤室、化学实验室、接种室（无菌操作室）、培养室、细胞学实验室等部分。 (1)生长素类：用于诱导愈伤组织形成，促进细胞脱分化；促进细胞伸长；诱导根的分化，促进生根。 IAA（吲哚乙酸）；NAA(萘乙酸)；IBA(吲哚丁酸)； 2,4—D(2,4—二氯苯氧乙酸) (2）细胞分裂素类：①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长。②促进细胞分裂与扩大。③抑制根的分化。 抑制衰老，减少叶绿素分解，有保鲜效果。 6—BA(6—苄基腺嘌呤)、Kt(激动素)、Zt(玉米素) (3)GA赤霉素 用于促进幼苗茎的伸长生长，促进不定胚发育成小植株；赤霉素和生长素协同作用，对形成层的分化有影响， 当生长素／赤霉素比值高时有利于木质部分化，比值低时有利于韧皮部分化。 高 有利于根的形成和愈伤组织 生长素/细胞