6根尖细胞有丝分裂的观察.pptVIP

实验6 植物细胞有丝分裂染色体制片及观察 一、实验目的 学习和掌握植物根尖细胞有丝分裂染色体压片技术；观察有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。 二、实验原理 有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞核内染色体能准确地复制，并能有规律地均匀分配到两个子细胞中去，使子细胞遗传组成与母细胞完全一样，从而保证了性状的发育和遗传的稳定性。 有丝分裂是一个连续的过程，可分为前期、中期、后期和末期。高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织。经过适当的取材处理、固定、离析、染色、压片等步骤，可获得清晰的植物细胞有丝分裂染色体动态变化的装片。以进行有丝分裂和染色体动态的观察。 三、实验材料 洋葱（Allium cepa）及蚕豆（Vicia faba）等 四、实验用具及药品 洋葱或蚕豆根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、醋酸洋红或改良碱性品红、酒精灯。 五、实验步骤 酸解: 取材 固定 解离 酶解 染色 压片 镜检 二、植物根尖分生组织压片法 1、取材 切取根长1－2厘米的黑麦或洋葱根尖1厘米进行前处理。 [一般在上午10－11时取材] 2、前处理 将切下的根尖放在0.4－0.2%的秋水仙碱溶液处理2－5小时，然后用水冲几次，或将材料放入蒸馏水中，在0－3℃的条件下处理24小时。 3、固定 在醋酸酒精液固定3－24小时，然后用95%酒精洗净其醋酸，移入70%酒精中，在阴凉处保存。 4、解离 将根从固定液中取出，用流水冲洗10分钟，放入1当量盐酸（1NHCl）中，于60℃下水解10分钟，或置盐酸酒精（INHCI与95%酒精各半）取出水洗2、3次，再放入2%果胶酶水溶液中，在室温下处理半小时，取出,水洗1－2次。 5、染色和压片 取解离后的根尖于载玻片上，滴加几滴改良碱性品红或醋酸洋红染液。放置约10分钟，待根尖染成暗红色，加盖玻片，用吸水纸放在盖玻片上面，用右手拇指在吸水纸上对准根尖轻压，或用解部针柄端轻轻敲击，将根尖材料压成一均匀薄层，注意不要移动盖玻片。 6、镜检 将所做玻片置显微镜下观察，可看到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体，为了观察染色体形态结构和进行计数，应找到分裂中期的细胞，若染色嫌浅，可从盖玻片一侧加洒液，同时在另一侧用滤纸片吸引染料，又可将载玻片在酒精灯上微微加热，染色体着色效果更好些。 * 40倍镜下观察的图像 间期：核小,染色均匀 - 前期:核膨大, 染色质螺旋化逐渐形成染色体,前期末核膜消失 中期:染色体排列在细胞中央的赤道面上 后期:着丝粒纵裂,姐妹染色体分离形成染色体,受纺锤丝的牵拉分别移向细胞的两极 末期:到达两极的染色体解螺旋形成染色质,核膜重现形成子细胞核,细胞中部出现细胞板 子细胞 *