致羔羊脑炎粪肠球菌PCR检测方法的建立和应用.pdfVIP

中国兽医科学2008，38(07)：595—599 Chinese Science Veterinary 852．611：Q 中圈分类号：S 503文献标识码：A文章编号：1673-4696(2008)07—0595-05 致羔羊脑炎粪肠球菌PCR检测方法的建立和应用 周 霞，王晓兰，剡根强，马 勋 (石河子大学动物科技学院，新疆石河子832003) 摘要：根据肠球菌的保守tuf基因设计引物，以致羔羊脑炎粪肠球菌基因组DNA为模板，扩增出了与 设计大小相一致的112 bp的基因片段，成功地建立了检测致羔羊脑炎肠球菌的PCR方法。确立的PCR反 min；94℃30S，55℃30S， 应最佳条件为：复性温度55℃，M92+浓度2．5弘mol／I。，最佳反应模式为95℃5 72℃30 S，35个循环；最后72℃延伸10min，于4℃结束反应。该方法能检测DNA的最小量为10fg。应 用该方法对分离的致羔羊脑炎粪肠球茵、由肠球茵导致发病或死亡羔羊脏器以及人工感染