小鼠血管内皮细胞的培养、鉴定及巨噬细胞移动抑制因子对其促增殖作用的研究.pdfVIP

· l0 · 放军医药杂志 2013年 1月 第25卷笫 1期 MedPhar A，y ． ! ．!! ： ! · 论著 · 小鼠血管内皮细胞的培养、鉴定及巨噬细胞移动抑制因子 对其促增殖作用的研究 段朝 霞，陈魁君，张洁元 ，李兵仓 ，王建民 [摘要 】 目的 探讨小 鼠血管内皮细胞的培养、鉴定方法及 巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)对其增殖活性的调节 作用 。方法 取小 鼠主动脉 ，去除周 围的脂肪和结缔组织，将动脉环剪成 0．5nlm大小，放入基质胶处理的 12孔培养 板 内，待细胞长满 ，用胰酶消化后 ，取单细胞悬液用抗 CD146免疫磁珠纯化 ，再用 CD31抗体鉴定细胞纯度 ，按 l0 个 细胞 ／-fL加入96孔板培养 ，细胞 70％～80％融合时用不 同浓度 M1F或 MIF抑制剂处理细胞 ，48h后用甲基噻唑基 四 唑 (MTT)检测细胞增殖程度 。结果 经 CD146磁珠纯化后细胞纯度为95％以上 ，MTT检测结果显示低剂量 MIF能 促进血管 内皮细胞 的增殖 ，并具有剂量效应关系，而高剂量 M