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使用EDTA抗凝血检测凝血酶原时间 作者：季明德，魏源华 作者单位：江苏省中医院检验科, 现阶段进行凝血项目检测都是用枸橼酸钠抗凝，抽取血液量与枸橼酸钠的比例是9：1，在真空采血管中包含固定量的0.3 ml抗凝剂，真空采血管内的负压保证了从血管中吸出2.7 ml血液。但是在实际情况中偶尔会发生血液量不足的问题，比例发生改变会影响凝血结果[1]。使用EDTA抗凝管可能会解决这个问题，因为EDTA粉末在 抗凝过程中几乎不对血液造成稀释，也就不会发生稀释比例的改变。本文研究在于诠释用EDTA抗凝时所测得的PT、INR结果与枸橼酸钠抗凝时的相关性。 ??? 1? 材料和方法 ??? 1.1? 仪器和试剂? Stago 公司生产的STA型全自动凝血分析仪，使用Stago 公司配套试剂，配套质控品。Dade-Behring公司生产的INR校准血浆； ??? 1.2? 标本来源? 收集本院健康体检者标本60例，男30例，女30例，年龄20～53岁；收集本院心胸外科心脏瓣膜置换术后及其它原因致PT延长病人标本60例，男35 例，女25例，年龄21～55岁。 ??? 1.3? 实验方法 ??? 1.3.1?? 枸橼酸钠抗凝血MNPT的计算? 同一仪器使用不同生产厂家、不同批号的凝血活酶试剂所计算出的正常人平均PT（MNPT）值是不一样的，故我们应重测所用凝血活酶试剂匹配的仪器MNPT 值，而不应使用生产厂家给我们提供的MNPT值[2]。计算MNPT需要至少20份正常血浆。本实验我们挑选60名健康体检者，经过仪器测试PT值，剔 除2S的数据, 经统计学处理，计算得出枸橼酸钠抗凝血的MNPT值。 ??? 1.3.2? EDTA抗凝血MNPT的计算? 60名健康体检者的EDTA抗凝血，测试PT结果后，剔除2S的数据, 经统计学处理，计算得出EDTA抗凝血的MNPT值。 ??? 1.3.3? Local ISI(仪器区域国际敏感指数)的建立? 仪器不可使用试剂说明书上附带的ISI值，因为此ISI值是试剂制造商用手工方法所测出的，并非是实验室仪器对所用批号凝血活酶试剂的Local ISI[3]，所以要重新建立Local ISI。用已标注INR值的校准血浆复溶后，在Stago仪器上测PT 2～3次，得出PT秒数均值，INR=（PT/MNPT）Local ISI，将枸橼酸钠及EDTA抗凝血各自的MNPT结果及已知的INR结果代入上式，即可求出Local ISI=lgINR/(lgPT－lgMNPT)，故能分别求出两种抗凝方式各自的Local ISI。 ??? 1.3.4? PT、INR的检测? 本院健康体检者标本60例，本院心胸外科心脏瓣膜置换术后及其它原因致PT延长病人标本60例用枸橼酸钠和EDTA抗凝管各抽一管血，3 500 r/min离心5 min,以制备乏血小板血浆，在4 h内完成检测。根据公式INR=（PT/MNPT）Local ISI，得到INR值。 ??? 1.4? 统计学方法? 对枸橼酸钠和EDTA抗凝所得的各120份标本的PT、INR结果进行线性回归统计，分析其相关性，并用配对t检验分析两者间是否存在显著性差异。 ??? 2? 结??? 果 ??? 2.1? MNPT结果? 橼酸钠抗凝血MNPT为13.8 s，EDTA抗凝血MNPT为18.6 s。 ??? 2.2?? Local ISI结果? 橼酸钠抗凝血Local ISI为1.24，EDTA抗凝血Local ISI为1.33。 ??? 2.3?? 枸橼酸钠抗凝血的PT结果为y，EDTA抗凝血的PT结果为x，结果见表1。经线性回归统计，两者间PT线性方程为y=0.86x- 2.8，R2=0.97, PT结果相关性好，经配对t检验，t=-29.8,P=0.00.05, 差异有显著性。 ??? 2.4? 枸橼酸钠抗凝血的INR结果为y，EDTA抗凝血的INR结果为x，结果见表1。经线性回归统计，两者间INR线性方程为 y=0.95x+0.03，R2=0.98, INR结果相关性好，经配对t检验，t=0.699，P=0.4920.05，差异无显著性。表1? 枸橼酸钠与EDTA抗凝血的PT、INR检测结果 ??? 3? 讨??? 论 ??? 3.1?? 研究发现PT、INR结果间是有相关性的，在临床上使用EDTA抗凝管检测PT是可行的。但同时也发现，PT结果间差异有显著性，两种抗凝方式下PT的生 物参考区间是不同的，所以要建立EDTA抗凝下PT的参考区间。INR结果间差异无显著性，因为我们重新计算了EDTA抗凝下的MNPT，从上述结果可 见，EDTA抗凝下的MNPT比枸橼酸钠抗凝下MNPT要长，通过PT/MNPT在一定程度上消减了EDTA抗凝下PT的延长，INR结果有良好的相关 性。因此我们可以报