血清清球蛋白分离.pptVIP

* 生物化学与分子生物学实验教学中心 血清清蛋白、g-球蛋白的分离、提纯与鉴定 王妮莎 * 内 容 实验目的 1 实验原理 2 实验材料 3 实验过程 4 5 注意事项 * 实验目的 1.盐析法 2.凝胶层析法 3. 离子交换层析法 4. 醋酸纤维素薄膜电泳法 5.了解柱层析技术 * 实验原理 分离和纯化是研究蛋白质结构、功能的重要前提。 不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等不同。利用这些性质，分离纯化蛋白质。 * 蛋白质的理化性质与常用的分离纯化方法 蛋白质的理化性质 常用的纯化方法 分子质量 透析、超滤 凝胶层析★ 离心 溶解度 调整pH 调整离子强度★ 降低介电常数 电荷 电泳★ 等电聚焦 离子交换层析★ 与其它物质特异结合 亲和层析 其他性质 吸附层析 液相层析 气相层析 * 球 蛋 白 ?1 ?2 ? ? 等电点 相对分子量（×104） 含量（％） 4.88 6.9 57~67 5.06 20 2~5 5.06 30 4~9 5.12 9~15 6.2~12 6.85~7.3 15.6~30 12~20 血清蛋白的等电点、平均分子量及正常含量 清蛋白 A * 1. 粗 提（盐析法） 血清蛋白质的颗粒、电荷和亲水程度不同，故盐析所需的盐浓度也不一样。 调节盐浓度，使不同的蛋白质沉淀，达到分离目的。 血清清蛋