CD28单抗对γδT细胞增殖和杀伤胃癌细胞的增强作用.pdfVIP

肖化及介入诊疗 2013年 第 18卷 第 1期 ModemDigestionIntervention2013，Vo1．18，No．1 — 1一 · 论 著 · CD28单抗对 ^yT细胞增殖和杀伤 胃癌细胞 的增强作用 冯永波 周忠海 陈复兴。 徐 涛。 徐 晶2 费素娟 摘【要】目的探讨CD28单克隆抗体对人外周血38T细胞体外增殖及杀伤胃癌BCG823、SGC7901 细胞活性的影响。方法 分离健康人外周血单个核细胞(PBMC)，分别在有或无 CD28单抗 (20 g，m1)参 与的条件下，加入到含帕米膦酸、IL一2的RPMI1640完全培养基中诱导培养38T细胞。在培养的第 10天 用台盼蓝染色计数细胞；采用流式细胞术检测各组38T细胞的纯度及其穿孔素、颗粒酶B和CD107a的 表达；用CCK一8试剂盒检测 细胞对 胃癌细胞BCG823的体外杀伤效应。结果 在诱导培养 10d后 。 两组 38T细胞纯度均达到70％以上，与无CD28单抗对照组相比，CD28单抗组38T细胞纯度显著高于 对照组；CD28单抗组38T细胞扩增倍数 、穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达及对 胃癌细胞 BCG823和 SGC7901的杀伤活性均显著高于无CD28单抗对照组。结论 CD28共刺激能增强 8T细胞增殖并通过 上调穿孔素和颗粒酶B的表达增强其抗肿瘤活性。 【关键词】CD28单抗；38T细胞；增殖；杀伤效应 Enhancedeffectofanti—CD28mAbONproliferationandkillingactivityofyST cellsagainstgastriccar— cinomacellsinvitro FENG Yong—bo1，ZHOUZhong-haF,CHEN Fu—xin ．XUTn XU Jinge,FElsu— juan．j)DepartmentofGastroenterology,theAffiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege，Xuzhon221002； 2)DepartmentofCentralLaboratory，the97thHospitalofPLA．Xuzhon221004．China；3)Out-patientde— partmentoftheJointLogisticsDepartmentofhteNanjingMiletaryRegin A【bstract】ObjectiveToinvestigatetheenhancedeffectofanti-CD28mAb(monoclonalantibody)on proliferationandkillingactivity of38T cellsagainstgastriccarcinomacellsincluding BCG823 cellsand SGC790lcellsinvitro．M ethods38Tcellsweregeneratedinvitrobystimulatingperipheralbloodmononu— clearcellsofhealthydonorswiht pamidronateandIL-2athteconditionwiht orwithoutanti—CD28mAb (20ug／m1)respectively．38Tcellnumberineachgroupwerecounteredbytrypanbluestainingonhte10thday afterculture．Thepurityof38Tcellsandhteirperforin，grna zymeB，IFN一^yandCD107aexpressionwereveri— fledbyflow cytometry．Thekillingactivityof38TcellsagainstBCG823cellswereanalyzedbyCCK-8kit． Results Theexperimentalresultsshowedhtatpurityof38Tcells