PRRSV云南株的分离与鉴定.pdf

( ) 动物医学进展 ,20 10 ,3 1 4 :1115 Pro gre ss in Vet erinary Medicine PR R SV 云南株的分离与鉴定 1 2 1 1 1 1 1 段博芳 ,沈艳萍 ,杨贵树 ,张飞 ,吴静敏 ,段 　纲 ,尹革芬 ( 1. 云南农业大学动物科学技术学院 ,云南昆明 65020 1 ;2 . 振太畜牧兽医站 ,云南镇沅 666508) ( ) 　　摘 　要 :从云南某猪场采取病料经 R TPCR 检测为猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRR S 阳性 ,将其处理后 ( ) ( ) 接种到猪肺泡巨噬细胞 PA M 和 Marc145 细胞上 。接种后 3 d ,猪肺巨噬细胞开始出现细胞病变 CP E ; Marc145 细胞盲传 3 代后 ,细胞也出现了 CP E 。对出现 CP E 的细胞培养物 ,用 R TPCR 法 、间接免疫荧光 试验进行检测 ,结果均为 PRR SV 阳性 ;细胞培养物经 P E G 初步浓缩后 ,接种到 PRR SV 阴性 , PRV 、CSFV 抗体阳性的仔猪 ,15 d 后猪只出现体温升高并伴有食欲减退 ,精神不振等症状 。采血并用同上的 R TPCR 法检测 ,结果为阳性 ;采血用同上的 R TPCR 法检测 ,结果亦为阳性 ;用电镜对纯化后的病毒进行观察 ,可见 有囊膜包裹的圆形病毒粒子 ,其直径约为 50 nm ; 间接免疫荧光实验可见黄色荧光 ; TCID50 测定其毒价为 - 4 . 75 ( ) 10 / 0 . 1 mL 。该病毒对氯仿 、紫外线 、酸碱度变化 p H 5 . 0 或 p H 7 . 5 和热敏感 ;结果表明 , 已成功分 离获得一株 PRR SV 云南地方流行毒株 ,命名为 YN1 。 　　关键词 :猪繁殖与呼吸综合征病毒 ;分离 ;鉴定 ( ) 中图分类号 :S852 . 659 . 6 ; S858 . 28 文献标识码 :A 文章编号 20 10 0400 1105 ( 　　猪繁殖与呼吸综合征 Porcine p ro ductive an d 是 PRR SV ,并对其进行初步鉴定 。 ) re spiratory syndro me , PRR S 是由猪繁殖与呼吸综 1 　材料与方法 ( ) 合征病毒 PRR SV 引起的以母猪繁殖障碍和仔猪 1. 1 　材料 呼吸衰竭为主要症状的传染病 , 临床症状主