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6100全血DNA提取中文操作手册 BloodPrep Chemistry 1 血样准备 血样处理请在采血后1 小时内立即进行。下面三种方法任选其一：（1）裂解全血；（2）分离血细 胞然后裂解细胞；（3）裂解、冰冻、储存全血或分离的血细胞。使用CPD ，ACD ，柠檬酸、EDTA 和肝 素等常用抗凝剂的抗凝血都可以在6100 上使用。150 µL 全血可以抽提3-8 µg 基因组DNA 。 1.1在2 mL 离心管或者deep well plate 中加入15 uL 蛋白酶K 溶液(20 mg/mL)； 1.2加入85 uL 蛋白酶K 消化缓冲液； 1.3加入150 uL 血样； 1.4用枪上下吹打3 次混匀。 2 全血裂解 2.1在58 ℃保温10 分钟，切勿超过60 ℃； 2.2加入500 uL BloodPrep DNA Purification Solution，总体积为750 uL；如果必要，可以温和加热纯 化液到37 ℃ 5-10 分钟以溶解盐沉淀； 2.3用枪上下吹打5 次混匀； 2.4(可选) 4 ℃保存血液裂解物；如果保存后出现沉淀，温和加热裂解物到37 ℃ 5-10 分钟并温和震荡 混匀。 3 DNA纯化 安装96-well Optical Rxn Plate、Splash Guard、Total RNA Purification Tray II等消耗品，将血液裂解物吸 到纯化板中，选择BloodPrep方案，确认其STEP 1被选中，运行下面步骤1～9。 用粘膜盖住空孔，或者用50 uL BloodPrep DNA Purification Solution预湿所有的空孔以保证真空。 步 骤 操 作 体 积 位 置 保 温 时 间 (sec) 真 空 (µL) （秒） (%) - 用DNA 纯化液预湿纯化板孔 50 废 液 - - 1 加样 650 废 液 300 80 2 加入BloodPrep DNA Purification 650 废 液 400 80 Solution 3 加 入 BloodPrep DNA Wash 650 废 液 60 80 Solution 4 加 入 BloodPrep DNA Wash 600 废 液 60 80 Solution 5 加 入 BloodPrep DNA Wash 300 废 液 60 80 Solution 1 6 预洗脱真空 - 废 液 120 100 7 废液位置的触离 - 触 离 - - 8 加 入 BloodPrep DNA Elution 100 收 集 180 120 60 Solution 1 9 加 入 BloodPrep DNA Elution 100