神经的保护剂鸡尾酒疗法对大鼠脑缺血的保护作用.pdf

孛文攘要 __-●———__#H_-_————w”____————__—¨十————_—_…___-—●——__“+——————“”H”1…。———-“～一一 神经保护剂鸡尾酒疗法对大鼠脑缺衄的保护作用 攘 要 缺盎蛙麟盘管癜楚基翁人类致恁窝致残麴主裴疾瘸之一，浅敏乏理 想治疗方法。大量动物实验研究袭明脑缺血后神经元的死亡不但有坏 楚熬过程，露虽更考攫亡的过程。分裂涉及主动移被动缨骢瓤亡瓿制。 在脑缺m急性期，神经元坏死与凋亡并存，细胞坏死位于缺m中心赜， 缀魏灏亡主要逛现在皎盘半蹬繁；嚣在麓蛱矗熬迟发性狰经元瑟亡嬲， 则以细胞凋亡为主。凋亡W能决定了最终梗死体积。细胞凋亡是在生 理耨病逐条件下静一葶挚主动嚣亡方式，燕受缍旋蠹墓骚秘一鬻缨麓辩 因子调控的生物学过程。bcl。2家族蛋白在神经元凋亡中起重要的作用， 中bcl．2是重要的抑制神经觉凋亡的蛋白，在缺m后注匙要存活的神经 元孛袭达。 缺姐后的缴联反应决定了神经元的命运。主要涉及氧自幽基的产 生、兴奋茬氨基酸静毒性律席、缩施内锊超载、能量代谢障礴及炎雠 介质的释放等机制。其中豁氨酸所介导的兴奋性毒性积继之的细胞内 锈趣载是导致神经元死亡的主要鞭因和罐后的熬蔺通潞。神经保护制 就是邋过抑制上述冥卷的瘸理生理过程来达到保护细戆的弱粒。针对 上述备缺血损伤环节的神经保护剂种类繁多，诸如自由基清除剂、兴 奋整氨罄酸撵铡裁、钙菇抗裁、缝量栈淤支持粼、各种搏经生长爨予 蹲。众多学者利用多种离体和在体缺血动物模激，应用各种单一神经 僚护帮均笺够不露糕度麴撼轻蕊接锈。谯令人爨惑煞是足乎囊毒熬攀 ～神经保护剂在动物模型有效而临床无效或效粜很差，有的因严重副 彳乍爱嚣羧麓了瘦嚣。这严重隈剿了棒经擦护裁静蠛床庭耀帮治疗效莱。 缺皿性脑损伤是～系列复杂的多因素过程，相互影响，互为因果， 健又遵循一是瓣律。锋黠强褥单一嚣繁的撵经镍护浚疗不霹能完全、 有效地阻断缺皿性脑损伤的级联反应。因此联合应用作用于缺血不同 臻苓酶裤经探护裁鄂静经舔护裁鸡蓬溪(co呔穗i玲疗法蘧逐步被谈谈謦瑶 遘视，主要是源于以下优点。首先作用予脑缺血损伤级联反艘不同环 中文摘要 节的神经保护剂联合应用能更有效地阻断级联反应，达到比任何单一 神经保护剂更好的脑保护作用，这一点对于在目前任何单一神经保护 剂均无确切临床效果的情况下尤重要。其次，联合用药可以减少单一 药物的有效剂量，降低与药物剂量相关的毒副作用。例如NMDA受体 拮抗剂MK．801在局灶性脑缺血的动物模型中神经保护作用明显，但 是因为严重的剂量相关性毒副作用限制了其在人类的应用但目前仍作 为急性缺血性卒中研究时的一种好的参照物。关于神经保护剂的联合 应用的动物试验已有少量报道，如Barth等应用大鼠海马切片培养，在 缺氧和无糖环境下，联合应用bFGF和MK．801，观察它们对神经元的 保护作用，证实bFGF加强MK．801的保护作用。但目前缺乏系统的 实验研究，尤其是无采用离体和在体缺血模型相结合的更为详尽和严 格按照卒中治疗学术性专题研究圆桌会议(Stroke Academic Therapy Industry 行的实验研究的报道。因此有必要遵循卒中治疗学术性专题研究圆桌 会议(Stroke Academic Therapy Industry 经保护剂临床前研究规范对神经保护剂．鸡尾酒疗法(cocktail)进行研 究，探讨其能否达到协同作用，有效地抑制级联反应及其相关作用机 制。为临床神经保护剂的应用开辟新途径。 本课题选择能量制剂1，6．二磷酸果糖(FDP)、N．甲基．D．天门冬 氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK。801和自由基清除剂～N．乙酰半胱氨 酸(NAC)联合应用，通过局灶性脑缺血模型和离体海马神经元培养 氧-糖剥离模型(OGD)相结合，采用神经病理学、免疫组织化学、原位 末端标记、Western印记等多种技术方法观察鸡尾酒疗法对大鼠大脑中 动脉闭塞(MCAO)后梗死体积、神经元凋亡及抗凋亡蛋白bcl．2表达 的影响及鸡尾酒疗法对离体海马神经元培养氧．糖剥离模59(OGD)神经 元凋亡及抗凋亡蛋白bcl一2表达的影响。探讨神经保护剂鸡尾酒疗法是 否较单一保