《Leica AF 6000 操作指南》.pdf

AF 6000 操作指南 一、开机 开机顺序：环境控制系统（热台、CO 控制器等）－显微镜控制箱－ 电脑－打 2 开软件 LAS AF 此时，就可以开始实验了。 注：在使用大的温控箱时，为了使得整个系统的温度达到一个稳定状态，建议提前 2 到 4 小时打开温控设备。 二、软件界面概览 （1）目录栏 包括 File 、Help ，从下拉菜单中还包括Wizard （实验向导）部分，可选FRET SE Wizard 、Live Data Mode 、Well Plate Acquisition 功能。 （2 ）箭头符号 指示实验的操作步骤（从左到右） Configuration （设置）、Acquire （采图）、Process （处理）、Quantify （定量）四 步 （3 ）标签区域 对于不同的箭头符号，有不同的功能 Acquire 符号：Experiment －实验文件目录，临时放在内存中 Setup －供设置实验进行的硬件 Acquisition －图像采集参数的设置 Process 符号：Experiment －实验文件目录，临时放在内存中 Tools ：处理图像的各种工具 Quantify 符号：Experiment －实验文件目录，临时放在内存中 Tools ：进行定量的一些工具 Graphs ：用图表显示定量的结果 Statistics ：用数据表格显示定量的结果 （4 ）工作区 以光路图为参考，设置图像采集的参数 （5 ）观察窗口 包括图像显示区域（5a ）和通道选择按钮（5b ） 三、多维图像采集的参数设置 Leica AF 系列软件主要针对高级荧光图像的采集，本章内容主要是有关在软件菜单 中设置采集图像的参数。 下面的采集模式处于菜单 Acquire - Acquisition 中 x 和 y 设置总是被激活的，在做 z 轴系列扫描时，需要激活 z 选项；在做时间序列 图像采集时，需要激活t 选项。 如果已经配置电动物台，则 Mark and Find 选项处于可选状态 如果激活拼图选项 ，则可连续拼接多个相邻视野，从而获得更大视野的图 像。 如果激活多点扫描选项 ，则可依次采集所设定的多个视野的图像。 光路的设置。 通过按钮 可选定需要设定的光通道，通过色表按钮 可设置色表（LUT, look-up table ），为采集的荧光定义伪彩。 通过 Contrast Method 菜单选择观察方式（明场 BF 、微分干涉DIC 或者荧光 FLUO ） 之后，可以选择 Emission Filter 和 Excitation Filter 来设置滤光片。如果选择!00%， 则表示选到无滤片的空位置。 荧光通道的数量可以通过“+ ”和“- ”来增加或减少。可以通过右键点击 改 变荧光通道采集的先后顺序。右键点击 也可保存单通道的设置参数。在 Load 和 Save 菜单中则可以保存和应用已保存的整个序列的采集参数。 Image 菜单用于设置摄像头的采集参数 这部分参数中，最重要的是 Binning 和 Exposure 。 Binning －在摄像头读取过程中，可以选择将多个像素合并一起读出，如Binning2 ×2 就是四个像素合并成一个像素读出。这样会提升信噪比，但是会降低分辨率。 Exposure －曝光时间。 Gain －对于摄像头信号的电子增益。 Intensity －对于光路中光的强度的条件，主要是对光强的减弱。 通过 按钮可以激活实时光强柱状图，显示整幅图片中光强的分布情况。 可以通过“Same Exposure for all probes”来设定所有采集通道使用相同曝光时间。 在 Acquire - Setup 中可以选择“Single image mode”，光路图下端就可以出现 “Single image”按钮，拍单张照片；而“Capture imag