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北方园艺 2007 (12) :55～59   应用于作物体细胞杂种鉴定的遗传标记方法 张　瑜 ,赵云云 (首都师范大学生命科学学院 ,北京 100037) 　　摘　要 :着重介绍了 4类遗传标记方法的原理及特点 ,简要概述了其在作物体细胞杂种鉴定 方面的应用进展。 关键词 :体细胞杂种 ;遗传标记 中图分类号 :Q 943　文献标识码 :A　文章编号 :1001 - 0009 (2007) 12 - 0055 - 05  　　作物体细胞杂种的鉴定研究离不开遗传标记 ,遗传 标记是遗传物质的特殊的易于识别的表现形式 ,可以用 于研究基因遗传和变异的规律。随着分子生物学和生 物技术的迅速发展 ,遗传标记技术也得到了迅猛的发 展。目前 ,遗传标记主要分为四大类 :形态学标记、胞 学标记、化标记和分子标记。形态学标记指可以观察 到的一些表型性状 ;细胞学标记主要包括核型、色体 带型等 ;生化标记主要是指同工酶和贮藏蛋白质等生化 物质 ;分子标记是以生物大分子 ,尤其是生物体的遗传 物质 - -核酸的多态性为基础的遗传标记。 1　形态学标记  　　植株形态、片形态、器官形态、实特征等形态 学特征是判断及筛选体细胞杂种的基本而又重要的标 准。形态学标记可以直接的体现杂种与双亲的形态区 别 ,方法非常简单。但是它易受环境和其它遗传效应影 响 ,且标记的数量较少。 2　细胞学标记 核型、色体带型和原位杂交及染色体的非整倍性 和结构变异等细胞学标记是鉴定体细胞杂种的一种有 效的方法。 2. 1　制片分析 通常以根尖、尖、叶、片愈伤组织等为材料 , 采用压片法进行染色体标本制备 ,需用卡宝品红、酸 洋红等染色液进行染色、检和计数。制片分析作为最 基本的细胞学分析手段 ,方法比较简单 ,但是易受材料 和时间的限制。 收稿日期 :2007 - 06 - 25 2. 2　原位杂交 signaling pathway in controlling cell death , defenses and cell growth [J ]. tein Rac is a regulator of cell death in Plants [J ]. Proc Natl Acad Sci USA , [29 ] Delledonne M , Xia Y, Dixon R A , et al. Nitric oxide functions as a [30 ] Pedroso M C ,Magalhaes J R ,Durzan D. Nitric oxide induces cell deat h [31 ]崔克明.植物细胞程序性死亡的机理及其与发育的关系[J ].植物 bi dopsis acd6 mutant reveals novel regulation and function of the salicylic acid Programmed Cell Death of Plant Induced by Stress ( Horticulture Department of Shanxi Agriculture University , Taigu , Shanxi 261061 , China) ding the possible pathways of signal transduction in PCD , the important enzyme related to PCD and so on. Key words :Plant ; Stress ; Programmed cell death 55 ? 1994-2008 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.  ?专题综述? 　　1969年 Gall、Pardue和 John等 (2002)首次建立该技 术 ,并应用于组织切片和细胞标本上。原位杂交技术 (in situ hybridization ,ISH)是根据核酸分子碱基互补配对原 则 ,利用标记探针与组织、胞或染色体的 DNA进行杂 交 ,对细胞中的待测核酸进行定性、位或相对定量分 析 (张明 ,曹家树 ,2000)。  北方园艺 2007(12) :55～59 3. 1　同功酶分析 由于酶的结构主要是由遗传物质 DNA分子上碱基 排列顺序决定的 ,因此对酶的分析可以间接反映不同生 物的不同基因结构。同功酶结构上的差异 ,可在电流中 表现出来 ,因而易于识别。 国内外近年来用同功酶分析法鉴定杂种 ,已取得了 随着组织化学和分子生物学的进一步的发展 ,染色 体原