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目 录 Ⅲ2删3删3哪2洲4舢9舢7
摘要……………………………………………………………………………………………………．．I
ABSTRACT……………………………………………………………………………………………………………。．．II
缩略词………………………………………………………………………………………Ⅲ
前言………………………………………………………………………………………………………………．．1
l禽流感病毒的概述…………………………………………………………………………．2
1．1AIV的病原学及分子生物学…………………………………………………………………2
1．2水禽流感研究进展………………………………………………………………………4
2禽流感的疫苗研究进展…………………………………………………………………………5
2．1灭活全病毒疫苗………………………………………………………………………………………．5
2．2亚单位疫苗………………………………………………………………………………………………5
2．3DNA疫苗……………………………………………………………………………………6
2．4重组活载体疫苗…………………………………………………………………………………………6
2．5反向遗传操作疫苗……………………………………………………………………………………．．6
3鸭瘟病毒载体研究进展…………………………………………………………………………7
3．1鸭瘟病毒概述……………………………………．．．…．．…………………………………………．．7
3．2鸭瘟病毒基因组特征………………………………………………………………………8
3．3鸭瘟疫苗研究进展……………………………………………………………………………………10
4本研究的目的和意义………………………………………………………………………………………．1l
3
试验一H5N1亚型禽流感病毒HA基因的克隆及序列分析………………………1
1材料与方法………………………………………………………………………………．．13
1．1材料 …………………………………………………………………………………………………13
1．1．1质粒和菌株………………………………………．：…………………………………………………．．13
1．1．25PF鸡胚…………………………………………………………………………………………………．．13
1．1．3主要试剂与工具酶……………………………………………………………………13
1．1．4主要溶液的配制………………………………………………………………………………………14
1．1．5主要仪器………………………………………………………………………………………．14
1．2方法 …………………………………………………………………………………………………．．14
1．2．1引物设计与合成………………………………………………………………………………．14
1．2．2鸡胚接种繁殖毒株…………………………………………………………………………．15
1．2．3病毒RbIA的提取………………………………………………………………………………．15
1．2．4反转录…………………………………………………………………………………．15
1．2．5
PCR扩增……………………………………………………………………．．16
1．2．6
PCR扩增产物的凝胶电泳…………………………………………………………………………16
1．2．7目的基因的回收纯化…………………………………………………………………………．．16
1．2．8目的基因与载体的连接……………………………．…………………………………………．17
1．2．9感受态细胞的制备……………………………………………………………………………。．．17
1．2．10连接产物的转化…………………………………………………………………………17
1．2．11碱裂解法小量制备质粒DNA…………………………………………………………．18
1-2．12重组质粒的鉴定……………………………………
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