抗病毒转基因番木瓜的实时PCR检测韩建勋.pdfVIP

20 10年第 1期 Vol. 20 No. 1 检验检疫学刊 JOURNAL OF IN SPECTION AND QUARAN TIN E 抗病毒转基因番木瓜的实时 PCR 检测 1 2 1 3 1 1 韩建勋 　陈红运 　邓婷婷 　杨雷亮 　黄文胜 　陈 颖 ( 1. 中国检验检疫科学研究院　北京 　100 123; 2. 厦门出入境检验检疫局 ; 3. 中山出入境检验检疫局 ) 摘要 　番木瓜是世界上第一种大规模种植的转基因水果 ,多个国家和地区开展了转基因番木瓜的研究 和田间试验 。针对市场上可能遇到的转基因番木瓜种类 ,本文分析了这些转基因木瓜的外源基因结构 ,在 ( ) 外源基因的 NO S启动子与植物基因组之间的侧翼序列中设计了 3类转基因木瓜的 4 个品系 Even t 的特异 性实时 PCR 的引物 /探针 ,建立了 4 种抗病毒转基因番木瓜的品系特异性实时 PCR 检测方法 ,优化了番木瓜 果肉和种籽的 DNA 纯化方法 。实验表明这些品系检测方法的特异性和灵敏度符合出入境检验检疫的要求 , 应用这些方法从市售的番木瓜中检出了台湾中兴大学研发的两个转基因品系 。 关键词 　转基因产品;转基因番木瓜 ;实时 PCR 方法 ; 品系特异性 中图分类号 　Q789 Rea l - T im e PCR M ethod for D etection of Genetica lly M od if ied Papaya 1 2 1 3 1 1 H an J ianxun , Chen Hongyun , D eng Tin ting , Yang L eiliang , Huang W en sheng , Chen Yin ( 1. Ch ine se A cadem y of In sp ection and Quaran tine, B eij ing, 100 123; 2. X iam en En try - Exit In sp ection and Quar an tine Bu reau; 3. Zhongshan En try - Exit In sp ection and Quaran tine B u reau) A b stract: Tran sgen ic p ap aya wa s first genetically mod ified fru it tree comm ercialized in the world. B y so far, m any coun trie s and area s have invo lved in the develop ing of the GM p ap aya. By comp aring and analyzing the gene con structu re s of the GM p ap aya wh ich m ay be found in the m arket, fou r sets of p rim ers and p robe s for even t sp ecific real tim e detection have been de signed and syn the sized ba sed on the flank ing sequence between the no s p romoter and p ap aya genom ic DNA. It wa s demon strated that the CTAB m