《PP3000T操作规程(修改版)》.docVIP

PP3000T操作规程 一、PrepDek?下面的总电源开关，打开触摸屏后面的开关，系统开始启动。 三、启动好后，通过双击屏幕上PP3000T程序来打开系统控制软件，会显示下图 四、在PP3000T软件控制界面中点击“START UP”会显示下图 选择“Auto Mode”显示如下 如果电镜准备好了（电镜真空已达到，电子枪处于关闭状态），点击OK后显示如下 这时，请把the pumpout valve安装到CHE3000上，点击OK后机械泵对Isolated line抽真空，当真空达到后会显示 这时，先把the pumpout valve上的黑色旋钮逆时针旋转到底，然后慢慢的把黑色旋钮拉出，点击OK，机械泵对CHE3000抽真空。当制备腔室达到高真空后系统会显示 这时，请往制备腔室上的0.75L杜瓦瓶中加入液氮，点击OK。 当系统识别温度下降后，系统自动的以较低（1L/min）的氮气流量对管路进行20分钟的吹扫清洁。在20分钟倒计时的同时，机械泵通过Isolated line一直对CHE3000真空管抽真空。20分钟结束后系统会显示 这时，先把the pumpout valve上的黑色旋钮慢慢的推到底，再顺时针旋转到底，最后慢慢拉到底。点击OK后会显示 这时，我们可选择用力拔开此阀（即移去此阀）后点击OK或直接点击OK（即不移去此阀）。注：CHE抽好真空后通常可保持使用2天，若第二天使用系统时，对CHE3000抽气的步骤可省略（即直接点OK）。 点击OK后会提示如下，同时氮气流量从立即从较低的1L/m变成较高的5L/m来冷却SEM中的冷阱和冷台。 这时，把CHE3000插入装有液氮的12L杜瓦中（注：把CHE3000插入液氮中前，请确认the pumpout valve处于关闭状态，否则机械泵油会发生倒流、即返油现象）。点击OK会显示 点击OK，设置冷阱和冷台的温度。冷阱的温度要求≤-170℃为宜，先设成最大流量5，当温度接近或达到-140至-150℃时，请把流量调节小一些（一般流量从5调节到3.5即可）；冷台温度一般设置为-130℃，先设成最大流量5，当温度接近或达到-110至-120℃时，请请把流量调节小一些（一般流量从5调节到2.7至3，并打开加热器）。注：12L杜瓦加满后通常可使用2天。 按View Log可切换“实时CCD图像”和“真空度/温度-时间记录图”。 气体冷却冷台和冷阱大约需要几分钟的时间，在此期间我们需要做好以下工作。 五、SEM的冷台和冷阱达到设定温度大约需要10分钟，在此期间我们需要做以下工作： 1.准备可能用到的工具——包括镊子、吹风机、碳导电胶水、工具刀、样品座等。 2.样品装载和制备——把样品座装载到样品梭上，再把样品装到样品座上，最好把样品梭装载到传输装置的传输杆上。注：不同样品需要不同样品座来装载，事先应想好该样品需用什么方法制备更合适、方便。 液体样品：用一针头串起来，预先将两个铆钉对胶起来（用502胶水在结合面外侧胶住）。装载液体样品时通常采用注射器注进铆钉中。 3.制造液氮雪泥 a.首先决定选用哪个雪泥制造罐（左边小罐或右边大罐）。 b.把雪泥制造罐中的聚苯乙烯材质的杯中加满液氮. c.盖好雪泥制造罐的盖子并用力摁住，按“SLUSH”按钮。 d.当看到液氮全部变成雪泥时（雪泥体积会膨胀），再按“SLUSH”按钮可停止对雪泥制造罐抽真空。 六、样品预冷 1.按“VENT”按钮对制备好雪泥的处理罐放气破真空，雪泥将变成 “过冷”液氮（-210度）。 2.把已装载好样品的传输装置头部迅速插入“过冷”液氮中，同时把传输装置与雪泥制造罐对接好，按“SLUSH”按钮。 3.打开PrepDek?上的灯（Desk Lamp），观察液氮，在液氮变成雪泥前把样品提拉到传输装置的真空保持腔体装置中，旋紧黑色锁紧旋钮，使样品保存在传输装置真空环境中。 4. 按“VENT”按钮对该雪泥制造罐放气破真空。取下传输装置。 5. 使用大罐时请注意：用钳子/镊子夹住样品梭，让梭底面接触液面稍停，然后快速插入液体中；插入后，钳子/镊子要放在液体中冷却待用（不可取出）。注：培养的细胞、细菌等样品可用“大罐+滤纸装载”法去做；滤纸装载要点是：切一小方块滤纸，四角用黑色冷冻胶固定在平样品座上，含水样品用移液器或注射器放置在小方块滤纸中间，用干滤纸吸收多余的液体，然后平放进大罐中预冷。注意先后次序：应先放液氮制雪泥，然后再将样品移液至小方块滤纸上。 七、转移样品到制备腔室 1.把传输装置迅速转移到制备腔室Airlock处与之对接好，按PUMP按钮后“PUMP LED”变为红色，机械泵开始对Airlock抽气，并迅速旋开（旋转3圈）传输装置上的黑色旋钮。 2.当“PUMP”和“Airlock”的LED变为绿色时，旋转下方Airlo