珊瑚藻硫酸多糖提取、分离纯化、结构鉴定及部分生物活性的研究.pdfVIP

中文摘要 珊瑚藻(Corallianofficirtalis)，是在中国和很多其它国家广泛食用的一种红 藻。本文以珊瑚藻为原料、对珊瑚藻多糖进行提取、分离纯化，并进一步对其 结构特征及生物活性进行了较为系统的研究，结果如下： 1．多糖提取、分离纯化研究：本研究中多糖提取采用两种方法进行对比试验， 一种是传统普遍的水提法，另一种是新型缓冲液酶辅助法进行珊瑚藻多糖的提 取。结果可知由缓冲液酶辅助法的多糖得率为5％，并且由于在提取过程中即加 入了木瓜蛋白酶进行脱蛋白，其粗多糖中蛋白含量仅为1．67％，省去了后续脱蛋 白这一步骤；而传统水提法粗多糖得率为2．5％，其粗多糖蛋白含量高达17．44％， 仍需进行蛋白去除。因此看来新型的缓冲液酶辅助法不仅提取率高，蛋白含量 少，而且简便，是一种理想的多糖提取方法。 A．25离子交换柱分离，洗脱液为 多糖的分离纯化，先经DEAE．Sephadex 0-2M NaCl溶液，来进行连续梯度洗脱，部分收集器进行收集，苯酚．硫酸法跟 踪检测总糖含量，通过该实验来进一步确定适宜的洗脱液NaCI浓度，再用阶段 洗脱法进行大量制各样品，本实验得到珊瑚藻多糖两种组份F1、F2，最后再经 酚硫酸法跟踪检测，所得峰形单一、狭窄对称，说明F1、F2已是均一化的纯多 糖。 2．珊瑚藻多糖(F1、F2)的理化性质研究：通过苯酚硫酸法、玫瑰红酸钠法、 考马斯亮兰法、凝胶过滤法等方法对其理化性质进行分析测定。结果如下：总 糖含量分别为44．54％、42．50％，硫酸根含量高达42．88％、43．29％，蛋白含量为 高的多糖，因此可将F1、F2命名为珊瑚藻硫酸多糖。此外，本研究采用溶剂解 离法对珊瑚藻多糖做了脱硫酸化处理，跟踪检测显示硫酸根含量显著下降，硫 酸根脱除率高达为87％，为下一步珊瑚藻多糖的结构研究做准备，将脱硫后的 F1、F2组份分别记作D．Fl、D．F2。 3．珊瑚藻硫酸多糖的结构研究：通过气相色谱法，红外光谱法、气质联用等手 段对F1、F2的结构进行了初步研究。结果如下：F1、F2单糖组成比较简单，均 比分别是5．63％、2．73％。红外光谱结果显示其具有硫酸基及羟基的特征吸收峰， 这与理化性质所测的结果是一致的。GC．MS结果分析表明F1的末端基有半乳 处有分支。 4．体外抗氧化活性研究：本文分别采用清除超氧阴离子自由基、羟基自由基、 有机自由基DPPH体系、还原力体系来分别对珊瑚藻多糖四个组份(F1、F2、 D．Fl、D．F2)的体外抗氧化活性进行测定。结果表明：珊瑚藻多糖在清除羟基 自由基体系中表现出较强的抗氧化能力，并具有显著的量效关系。此外，在其 它体系中也具有良好的抗氧化能力，且F1的抗氧化能力稍高于F2组份，硫酸 根含量高的组份的抗氧化效率明显高于硫酸根含量低的组份。因此可以说明珊 瑚藻硫酸多糖抗氧化活性大小与其分子量、硫酸根的含量关系密切，还可能与 珊瑚藻多糖的结构有关，其机制有待更深一步探讨。 5．体外保湿功能研究：本实验以国标药典中药物引湿性试验指导原则为标准， 采用体外称量法，分别在不同的湿度环境下，对所提取5种多糖组份(WCP．1、 F1、F2、D．F1、D．F2)的保湿和吸湿活性进行了相关研究，实验以甘油和硫酸软 骨素为对照，研究结果表明：水提珊瑚藻多糖WCP．1的吸湿功能显著高于其它 四个组份，在60小时内，相对湿度为83％和41％条件下，水提珊瑚藻多糖的吸 湿率呈上升的趋势，比对照品甘油和硫酸软骨素还高，高达82．29％。保湿实验 表明，在干燥硅胶和湿度为41％的条件下，WCP．1的保湿率略低于甘油，说明 珊瑚藻多糖具有一定的稳定、持久保湿性能，表明珊瑚藻多糖可作为一种F1用 化妆品保湿剂的产品进行开发利用。 关键词：珊瑚藻；硫酸多糖；结构鉴定；抗氧化；保湿 Abstract Corallian tothe real officinalis，belongs eateninChinaand othercountries． Rhodophytasubclass(Florideae)，iswidely many Inthis character