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2013年高中生物 6.2 DNA片段的扩增 PCR技术同步训练 中图版选修1
1.在实验室内模拟生物体内的DNA复制需要哪些条件( ATP ④DNA分子引物 ⑥tRNA ⑦适宜的温度 ⑧适宜的酸碱度 B.②③④⑤⑥⑦解析:选D在实验室内模拟DNA复制时需要DNA聚合酶催化合成DNA子链;四种脱氧核苷酸为合成子链的原料;DNA母链为DNA复制的模板;还需要引物;还有适宜的温度适宜的酸碱度等2.标准PCR过程一般分为变性复性延伸三大步这三大步需要的温度依次是( )解析:选A当温度在95 ℃时双链DNA解旋为单链称之为高温变性;当温度下降到55 ℃时两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合称为低温复性;当温度上升到72 ℃时溶液中的四种脱氧A、T、C、G)在TaqDNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA链称为延伸3.如图表示PCR扩增的产物请分析它是哪次循环的产物( )
A.第一次循环 B.第二次循环第三次循环 D.第四次循环解析:选A在PCR反应中以引物为标记第一次循环时以加入的DNA为模板DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸所以形成的每个子代DNA中只有一种引物从第二次循环开始第一次产生的DNA分子又可作为模板参与反应形成的DNA分子两端都含有引物4.(2012·银川一中高二检测)关于PCR技术的应用错误的一项是( )古生物学刑侦破案序列测定诊断遗传病基因克隆古生物学序列测定基因克隆刑侦破案诊断遗传病合成核苷酸序列测定解析:选D技术在医学上用于遗传病的基因诊断基因克隆序列测定法医上用于刑侦破案古生物学上用于生物化石样品分析技术是以4种脱氧核苷酸为原料合成双链DNA的过程技术不能合成核苷酸5.Taq聚合酶的热稳定PCR的前提条件也是PCR技术能迅速发展和广泛应用的原因聚合酶还具有逆转录性其作用类似于逆转录酶聚合酶表现为Mg依赖该酶的催化活性对Mg浓度非常敏感测定结果为MgCl浓度在2.0 mmol/L时该酶催化活性最高此浓度能最大限度地激活Taq聚合酶的活性过高就会抑制酶活性因此MgCl的浓度在不同的反应体系中应适当调整优化浓度(1)从材料可知影响PCR反应的因素除引反应温度和Taq聚合酶外还应有________(2)Taq聚合酶的作用是________________且只能由________端开始(3)“PCR”与人体内的DNA复制相比有何不同之处?_。
(4)实验室中微生物的筛选应用了Taq细菌能在热泉中生长的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件:________________、________等解析:PCR技术所需条件是模板引物原料聚合酶和Mg同时需要恰当的温度及缓冲液维持近中性酸碱度是体外扩增模板DNA与细胞内的DNA复制不同需要耐高DNA聚合酶通常用Taq聚合酶且引物为DNA聚合酶是从生活在热泉中的Taq细菌中提取出来的一种耐高温的DNA聚合酶答案:(1)Mg (2)催化合成DNA子链 3′(3)PCR技术发生在体外且需耐高温的Taq聚合酶引物为DNA (4)较高温度 营养物质 适宜pH1.DNA的复制需要引物其主要原( )可加快DNA的复制速度引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合引物的5′端有助于DNA聚合酶延伸DNA链聚合酶只能从3′端延伸DNA链解析:选D的两条链是反向平行的为了明确地表示DNA的方向通常将DNA的羟基(—OH)末端称为端而磷酸基团的末端称为5′端聚合酶不能从5′端开始合成DNA而只能从3′端延伸DNA链因此复制需要引物当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸2.下列有关PCR的描述不正确的是( )是一种酶促反应引物决定了扩增的特异性扩增产量为y=(1+x)扩增对象是氨基酸序列解析:选D是一种体外迅速扩增DNA片段的技术它以极少量的DNA以四种脱氧核苷酸为原料在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸短时间迅速复制上百万份的DNA拷贝其扩增产量为y=(1+x)代表DNA片段扩增后的拷贝数表示平均每次的扩增效率代表循环次数3.(2012·长安一中高二检测)用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸是一小段( )或RNA D.双链DNA解析:选A用于PCR的引物是一小段DNA(单链)细胞内DNA复制的引物一般为RNA4.PCR利用了DNA热变性的原理仪实际上是一种能自动调控温度的仪器对PCR过程中“温度的控制”的说法中错误的是( )酶促反应需要高的温度是为了确保模板是单链延伸的温度必须大于复性温度而小于变性温度聚合酶不具热变性要用耐高温的聚合酶解旋酶不具热变性为了确保模板是单链解析:选D是一种体外DNA扩增技术双链的解开不需
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