13 植物分类学新方法课程.pptVIP

细胞分类学在上世纪三十年代以后诞生。其方法主要是研究染色体数据，包括染色体数目、核型分析、染色体带型分析、染色体组分析等。目前，在许多动、植物分类工作中，像形态学特征一样，染色体数据已经成为分类的基本数据，是现代综合分类的重要组成部分。 教材中以葱属宽叶组植物细胞分类学研究为例介绍细胞分类学技术（引自景望春、许介眉等，《葱属宽叶组植物细胞分类学研究》，《植物分类学报》，1999，37（1）：20~34）。 用植物化学方法来研究分类，其主要对象是植物代谢的次生成分中有限分布的一些化合物。所谓次生成分是指一般在基本代谢中积累起来，而无明显作用的，储存在活细胞或者像树脂管这类组织中的一类物质，常被称为“植物代谢的副产物”。用生物化学的方法来研究植物分类，其对象主要是一些大分子化合物，如蛋白质、酶和核酸等。蛋白质分子中比较可变的部分，对于分类学和系统学更为重要，因为他们的差异反映了突变型的变化。 常用的方法包括： 层析法 光谱法 层析法 纸层析：用层析纸点上所要分离的化合物，在一定的溶液下展开，使它的组成成分分布在各特定的位置，并用显色剂显色后进行观察测量。这种方法在测定一些水溶性的植化成分（如糖和氨基酸等）时多采用。 薄层层析：把吸附剂放在一块干净的玻璃板上，散成一薄层，于是这块板就如同层析纸一样，经过滴样、展开、显色就可得到不同的点子，显示它们不同的组成成分。 此外还有旋转薄层层析、气相层析等方法。 光谱法 紫外吸收光谱：紫外吸收光谱常用的波长范围是200~400nm，在此范围内一般只有不饱和键的化合物才能表现出吸收光谱，所以只有具不饱和结构的的化合物才能产生紫外吸收光谱。紫外吸收光谱与分子中电子跃迁有关，由于分子结构的不同，电子跃迁所吸收的能量就有差异。因而，不同的化合物可以表现出不同的紫外吸收光谱。 此外还包括红外吸收光谱法。 DNA－DNA杂交法 原理 利用DNA双链之间的互补关系，将所得到的不同个体的单拷贝DNA进行杂交，而后使杂交的DNA双链解链，同源性高的杂合DNA双链所需解链温度高，反之，温度低。可以根据解链温度来判断植物个体这间的同源性，进而确定它们之间的亲缘关系，为系统和进化的研究提供资料。该方法只适合单拷贝DNA，且基因组大小差异会影响结果的准确性。 DNA序列分析法 原理 通过DNA克隆，PCR扩增等方法获得目的DNA片段，然后进行DNA序列测定，比较不同植物类群之间的差异，获得较准确、全面的亲缘关系信息。然而此法在技术和经费上要求高，很少有实验室能承受。 限制性长度片段多态分析法 这种方法所获得的信息介于上述两种方法之间。该法是选择不同植物个体相应的DNA材料，通过限制性内切酶作用，将DNA分子在一定的酶切位点切断，水解成长短不同的DNA片段，将所获得的DNA片段进行电泳，不同大小的DNA片段便会因各自的迁移率不同而被分开，若以已知大小的DNA片段进行电泳作为标准（marker），由于DNA片段的迁移距离与其分子量的对数呈正比，将已知大小的DNA片段及其电泳迁移率作一标准曲线，就能根据样品DNA片段的迁移距离计算出样品DNA片段的大小。现在已有一些计算机程序可直接计算出DNA的分子量大小，如DFRAG303。 * 13 植物分类学新方法 13.1 细胞分类学方法 13.2 化学分类学方法 13.3 血清分类学 13.4 数值分类学方法 13.5 超微结构和微形态特征在被 子植物分类中的应用方法 13.6 限制性片段长度多态性（RFLPs） 在系统学研究中的应用 13.1 细胞分类学方法 13.1 细胞分类学方法 细胞分类学(cytotaxonmy)是利用细胞学特征进行生物分类的学科。又称细胞系统发育(cytophylogeny)或核系统学(karyosystematics)。实质上仅基于染色体的数目、结构与行为的分析。所以有些学者又称其为染色体系统发育(chromosome phylogeny)或染色体分类(chromosomal taxonomy)。 13.2 化学分类学方法 13.2 化学分类学方法 化学分类学，在高等植物中，一般是指利用次生代谢物来研究植物系统学的一门分枝学科。 13.2 化学分类学方法 生物碱是最大的一类化合物，由于对各种生物碱在植物体中的合成途径缺乏系统了解，因此目前几乎没有人对存在于高等植物中的不同生物碱类型作系统上的比较。但苄基异喹啉类生物碱在生物合成上的一致性以及在植物中呈连续分布的状态，使得它们在被子植物中成为非常有用的分类学指标。环烯醚萜类