PCR技术浅析..pptxVIP

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2017-10-07 发布于湖北
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PCR技术浅析..pptx

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分子生物学原理与方法;主要内容;聚合酶链式反应（PCR）;PCR的基本原理;PCR反应过程 ;PCR反应过程 ;温度与时间;PCR 的反应体系;1、引物;引物设计的原则;实例：设计引物;;;;2、酶及其浓度;3、dNTP 的质量与浓度;4、模板DNA;5、Mg2+浓度;PCR扩增产物的分析方法;PCR产物电泳可能出现的问题; 阴性;假阳性;出现非特异性扩增带 ;出现片状拖带或涂抹带 ; 提高PCR扩增的特异性升高退火温度缩短延伸时间降低引物和酶的浓度适宜的Mg2+的浓度引物设计的特异性减少循环次数 ;核酸测序技术 ;与 PCR反应类似。反应体系中包含：模板 DNA, Taq酶, dNTPs, ddNTPs和测序引物；反应过程：变性－复性－延伸－终止 ;Dideoxynucleotides（双脱氧核苷酸）;荧光分析;序列分析;;;基因的构建;