《EGCG对人肝癌细胞的抑制作用及其可能的机制.》.pdf

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org ChinJCancerBiother，Feb．2014，Vo1．21，No．1 · 38 · doi：10．3872／j．issn．1007-385X．2014．O1．007 · 基础研 究 · EGCG对人肝癌细胞的抑制作用及其可能的机制 张勇，沈筱芸，冯雁，谢裕安 ，张力图，利基林，罗小玲 (广西 医科大学附属肿瘤 医院 实验研 究部，广 西 南宁 530021) [摘 要] 目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)一epigallocatechin一3一gallate，EGCG]对体外培养的人肝癌细胞株生物学 特性的影响，研究其作用效果与血红素氧合酶一1(hemeoxygenase一1，H0—1)及相关信号分子的关系，探讨其作用机制。方法 ： 利用MTr法检测EGCG对HepG2、Sk—hepl、SMMC7721等肝癌细胞增殖的影响，并用吖啶橙 ／溴化乙锭 (AO／EB)双染法观察肝 癌细胞的形态学变化，流式细胞术检测 EGCG作用后Sk—hepl细胞周期的变化，Real—timePCR和Westernblotting法检测EGCG 作用后 Sk—hepl细胞中HO一1、IL一10及TNF—等信号分子表达的变化。结果：EGCG作用后，3株肝癌细胞贴壁细胞数量显著 少于对照组 ，凋亡细胞数增多[HepG2：(16．33±3．51)us(3．67±1．15)个 ，P0．01)，Sk—hepl：(18．33±2．31)vs(2．33± 2．08)个，P0．01)，SMMC7721：(15．33±3．06)us(3．33±2．08)个，P0．O1)]。实验组 Sk—hepl细胞G2／M期比例明显高于 对照组[(34．33±8．09)％ (3．07±2．32)％，P0．01]。设对照组基准值为 1．00，实验组Sk—hepl细胞中HO一1、IL一10、及 TNF．ot的mRNA相对表达水平依次为 (0．58±0．15)、(5．91±1．11)、(5．29±1．14)，差别均有统计学意义 (P0．01)；与对照 组相 比，实验组 HO一1蛋 白表达水平明显下调 (0．16±0．04us0．33±0．08，P0．05)，IL一10(0．42±0．06us0．24±0．08，P= 0．034，P0．05)和TNF．蛋白(0．95±0．17vs0．58±0．08，P0．05)表达水平明显上调。结论 ：EGCG可抑制肝癌细胞增殖 及诱导细胞凋亡，并将Sk—hepl细胞阻滞在G／M期，其机制可能与HO一1、IL一10、TNF一0l等炎症信号分子表达的变化有关。 [关键词] 没食子儿茶素没食子酸酯；肝癌细胞；血红素氧合酶一1 [中图分类号] R735．7；R730．5 [文献标志码] A [文章编号] 1007—385X(2014)01-00384)6 Epigallocatechin-3--gallate—·induced growth inhibition and theunderlyingmecha- nismsin human hepat0ce儿ularcarcinomacells ZhangYong，ShenXiaoyun，FengYah，XieYu’an，ZhangLitu，LiJilin，LuoXiaoling(DepartmentofResearch，Affili— atedCancerHospitalofGuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，Guangxi，China) 【Abstract] Objective：ToinvestigatetheeffectofEpiga11ocatechin一3一gallate(EGCG)onhepatocellularcarcinomacell growthandthemolecularmechanismsunderlyingtheeffeet vitro．M ethods：Threehumanhepatocellularcarcinomacell lines(i．e．，HepG2，Sk—heplandSMMC7721)wereusedinthisstudy．Cellswereculturedinthepresenceof0，40，80 or120 g／