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《HBx基因通过调节凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值促进人肾小管上皮细胞凋亡.》.pdf
中国医科大学学报 第43卷 第 1期 2014年 1月
· 38· JournalofChinaMedicalUniversity Vo1.43 No.1 Jan.2014
· 论 著 ·
HBx基因通过调节凋亡相关蛋白Bax/Bcl一2比值促进
人肾小管上皮细胞凋亡
何平 ,李红 ,李德天 ,冯国和
(中国医科大学附属盛京医院1.肾内科;2.心内科;3.感染科,沈阳 110004)
摘要 目的 探讨HBVx基因(HBx)对人 肾小管上皮细胞株(HK.2)增殖和凋亡的影响及机制。方法 采用脂质体转染法,将
质粒pCDNA3.1(+)HBx转染至HK。2细胞株。细胞实验分5组,对照组、转染空质粒pCDNA3.1(+)组、转染pCDNA3.1(+)HBx
24h组、转染pCDNA3.1(+)HBx48h组、转染pCDNA3.1(+)HBx72h组。CCK8方法检测瑚 x对各组细胞增殖抑制率的影响;用
透射电镜及AVP/I双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。应用免疫细胞化学及免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl一2水
平。结果 经酶切鉴定及测序结果显示pCDNA3.1一HBx构建成功。与对照组相比,空质粒组细胞存活率及凋亡率无明显差异,
凋亡相关蛋白Bax/Bcl一2比值无明显差异(P0.05)。转染HBx基因24h后,细胞增殖明显受抑,凋亡率显著增加 ,Bax/Bcl一2比
值开始增高。至72h,细胞增殖抑制率最高达到 (35.27+1.10)%,细胞凋亡率达到最高为(23.80+2.16)%,Bax/Bel一2比值显著增
高。与对照组及其他各组比较,具有显著性差异 (P0.05)。结论 HBx基因可抑制HK.2细胞增殖并通过提高凋亡相关蛋白
Bax/Bcl一2比值诱导其凋亡。
关键词 HBx基因;HK一2;凋亡;真核表达载体;乙肝病毒相关性肾炎
中图分类号 R512.6 文献标志码 A 文章编号 0258—4646(2014)01—0038—07
网络出版地址 http:/w/ww.cnki.net/kcms/detail/21.1227.R1703.001.html
HBxGenePromotesApoptosisinHK--2CellsThroughRegulatingApoptosis--relatedProteinRatioofBax/Bcl-·2
HEPing,LIHo ,LIDe—fian,FENG Guo-he。
(1.DepartmentofNephrology,ShengjingHospital,ChinaMedicalUniversity,Shenyang110004,China;2.DepartmentofCardiology,Shen~ingHospital,ChinaMedi—
calUniversity,Shenyang110004,China;3.DepartmentofInfectiousDiseases,ShengjingHospital,ChinaMedicalUniversiyt,She~ g110004,China)
AbstractObjective TodiscusstheinfluenceofHBVXgene(HBx)onhteproliferationandapoptosisofhumanrenaltubularepihtelialcellline
(HK·2).Methods Theexperimentwasdividedintofivegroups:htecontrolgroup,cellstransfectedwihtemptyplasmidPCDNA3.1(+),PCD—
NA3.1(+)HBx24h,PCDNA3.1(+)HBx48hnadPCDNA3.1(+)HBx72h,respectively.TheCCK8mehtodwasusedtodetecthteinfluence
ofHBxtohteinhibitionratesofcellproliferationineachgroup,nadtransmissionele
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