分解纤维素的细菌的分离.ppt

二、实 验 设 计 四、结果分析与评价 课堂练习 D 3.纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于其含有 ( ) A．NaNO3 B．KCl C．酵母膏 D．纤维素粉 C 4.刚果红染色时，加入刚果红可在( ) ①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤培养基上长出菌落时 A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤ 6．下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题： (1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明___________________。 (2)某同学根据需要，配制了纤维素分解菌的培养基如下，整个实验过程严格执行无菌操作。 如果将其中的纤维素粉换成________，菌落数____________________________，即可说明选择培养基的作用。 (3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用________ 法， 原因是________________________________________________________________________。 为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______ 发酵和______ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________ 含量进行定量测定。 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 分解纤维素的微生物的分离 纤维素酶 种类、作用、催化活力 刚果红染色 筛选原理 实验设计 土壤取样 选择培养 纯化培养 涂布鉴别培养 前置染色法 后置染色法 富含纤维素土壤 增大分解菌含量 染色鉴别 分离出分解菌 课堂总结 1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是 （ ） A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 D 2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是 （ ） A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛　选出了纤维素分解菌 B 5．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(　　) A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B．富集培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少 C．经稀释培养后，用刚果红染色 D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上 解析：经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物. A 根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 适量 0.5 g 0.5 g 酵母膏、水解酪素 KCl MgSO4·7H2O 0.9 g 1.2 g 1 g 5 g KH2PO4 Na2HPO4·7H2O NaNO3 纤维素粉 葡萄糖 明显多于选择培养基上的菌落数 稀释涂布平板 平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌数 * * ㈠纤维素与纤维素酶 1.纤维素 纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。 一、基础知识 棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。 思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过70亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？ 纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。 2.纤维素酶 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(外切酶)、CX酶(内切酶)和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维二糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 ①取二支20mL的试管 实验：纤维素酶分解纤维素的实验 ②各加入一张滤纸条 ③各加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸－醋酸钠缓冲液11ml和10ml 甲 乙 ④在乙试管中加入1mL纤维素酶 ⑤两支试管固定在锥形瓶中，放在 140r/min的摇床上振荡1h ⑥结果：乙试管的滤纸条消失 讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？ 滤