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- 2015-12-07 发布于湖北
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遗传标记.ppt
伯乐相马 细胞学标记的特点 不易受环境影响,呈孟德尔方式遗传。 多态性集中表现在染色体高度重复DNA结构的异染色质所在的部位。 细胞遗传标记经常伴有对生物有害的表型效应,难以获得相应的标记材料,或者观测和鉴定比较困难;需要花费较大的人力和较长时间来培育,难度很大;同时某些物种对染色体变异反应敏感;还有些变异难以用细胞学方法进行检测。 理想的遗传标记应具备的特点 遗传多态性高; 检测手段简单快捷,易于实现自动化; 遗传共显性,即在分离群中能够分离出等位基因的3种基因型。 标记遍布整个基因组; 准确性,能正确反映动物的真实遗传,即标记是经济性状基因,还是与影响重要性的性状连锁。 实验重复性好(便于数据交换); 开发成本和使用成本尽量低廉; 原位杂交技术主要步骤: 材料处理及细胞样品的固定; 样品的制备和预处理; 探针的制备和预杂交; 探针及样品的变性; 杂交温育; 检测杂交信号,进行结果分析。 探针制备技术 探针的制备主要采用缺刻平移法、随机引物法、末端标记法。 探针的标记物分为同位素标记和非同位素标记两大类,前者标记物一般为3H 、35S或32P,后者有生物素或地高辛的间接标记或利用罗丹明对探针分子进行直接标记。 切口平移法 原理:DNA酶I在Mg2+离子存在时,能在双链DNA的各股单链的不同位置上造成随机切口,然后在存在着一种已标记dNTP底物的体系中用大肠杆菌聚
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