宿主因子MOV10抑制XMRV复制机制地研究.pdf

目 录 摘要……………………………………………………………………………………………………………………………………3 Abstract…．．．．．…．…．．．．．…．．…．…．．……．…．………．…．．．．．……．．……．．…．…………．…．…．……．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．…．4 1．前言…………………………………………………………………………………………………………………………．6 2．实验材料和方法…………………………………………………………………………………．．10 O 2．1实验材料…………………………………………………………………………………一l 2．2实验方法…………………………………………………………………………………一13 3．实验结果…………………………………………………………………………………………．．27 3．1MOVl0对XMRV感染性的抑制作用……………………………………………………27 (1)过量表达MOVl0蛋白对XMRV感染性的影响…………………………………27 (2)MOVl0抑制XMRV感染性的剂量关系…………………………………………27 (3)内源性MOVl0的敲除对XMRV感染性的影响…………………………………29 3．2MOVl0抑制XMRV复制的机制…………………………………………………………30 (1)XMRV病毒颗粒中的MOVl0……………………………………………………一30 (2)MOVl0对XMRV发挥抑制作用的主要阶段……………………………………．30 3．3MOVl0抑制XMRV复制的关键结构域…………………………………………………32 (1)MOVl0酶活性位点的突变体对XMRV感染性的影响…………………………．32 4．结论………………………………………………………………………………………………………………………………．．37 5．讨论………………………………………………………………………………………………………………………………．．：；7 6．参考文献…………………………………………………………………………………………．．39 附件一：不同物种中MOVl0的氨基酸序列和7个保守结构域…………………………………43 附件二：综述一……………………………………………………………………………………．．44 附件三：综述二……………………………………………………………………………………一53 附件四：个人简历…………………………………………………………………………………．．60 附件五：致谢………………………………………………………………………………………．．62 附件六：独创性声明………………………………………………………………………………一63 2 万方数据 摘要 异嗜性鼠白血病病毒相关病毒(XMRV)是新发现的一种具有完全复制能力的 1，逆转录病毒。早期研究报道XMRV可能与人类疾病前列腺癌、慢性疲劳综合症 (CFS)有关，但随后的研究中未能在前列腺癌和慢性疲劳综合症的组织样本中检 测出XMRV，甚至在早期检出XMRV的样本中也未能检测出XMRV，认为早期的 研究结果是实验过程中的污染导致的，排除了XMRV与这两种人类疾病的直接关 系。最新研究证实XMRV是在产生前列腺癌细胞系时由两个内源性鼠白血病病毒 重组产生的。虽然最近的研究报道XMRV感染与人类疾病之间并没有直接关系， 但XMRV仍然是一种未定义的潜在病原体，因为在体外它仍具有感染人类细胞的 能力。并且XMRV具有丫逆转录病毒的性质，可以作为模式病毒研究宿主细胞因 子与逆转录病毒之问的相互作用。研究发现在宿主细胞中存在一些限制因子 APOBEC3和Tetheri