利用噬菌体展示的p53蛋白表位进行肿瘤检测方面研究.pdfVIP

摘 要 p53是一种在肿瘤中突变率很高的抑癌基因，很多情况下p53基因的突变产生p53 蛋白血清抗体。在肿瘤早期阶段，即能检测到血清p53抗体的存在。因此在肿瘤研究 中。p53抗体成为一种肿瘤特异性的标志物，它对肿瘤发生的及时诊断和大范围人群的 肿瘤筛查有重要意义。 噬菌体展示技术是一项将外源多肽片段插入丝状噬菌体外壳蛋白从而展示在噬菌 体表面的一项生物技术，由于展示的外源多肽依然保持其原有构象及生物学活性，因 此可以像一个配子或效应子一样在许多重要的生物系统中发挥作用从而广泛应用于现 代生物学的多种领域。在抗体检测方面，噬菌体展示技术可以展示抗原的线性表位， 以该杂和噬菌体作为抗原来检测抗体，方法简单、快速，成本低且有较好的特异性和 灵敏性。 菌体表面，分析得到的杂和噬菌体的免疫学性质，并以该杂和噬菌体为抗原，用间接 到p88载体，并能成功分泌表达展示有该外源多肽的杂和噬菌体。纯化得到的噬菌体 进行SDS—PAGE电泳显示展示效率达20—25％，且达到了理想的纯化要求。将纯化得到的 杂和噬菌体进行Western 抗体，具有较强的免疫原性。进行肿瘤检测显示对肺癌、耳鼻喉癌、肠癌等的检测有 较好的效果，说明以杂和噬菌体为抗原的检测p53抗体的方法有可能成为快速、高效、 廉价的肿瘤诊断方法。耳鼻喉癌、肠癌．说明以杂和噬菌体为抗原的检测p53抗体的 方法有可能成为快速、高效、廉价的肿瘤诊断方法。 关键词t p53突变；肿瘤检测；p53抗体；噬菌体展示：表位 Abstract all in hasa mutationratein is human,which gene 11igh p53 importanttumor-suppressor conditionsmutationcaninducethe ofserBm varianttumors．On production many p53 antibodies the ofsome antibodiesCan tumors，the anti—p53 053Abs)．Atearlystage anti·p53 of antibodiesbecomeal【indof bedetected．Thusinthestudies tumor,anti—p53 specific has tothe oftumor markerof andthe tanlor,it importantsignificanceearlydiagnosis oftumorsona scale． check-up large isa allextrinsic display biologicaltechniqueincorporating Phage technique polypeptide theN-terminal offilament into ofcoa