354微生物限度检查标准操作规程.docVIP

文件内容： 1、目的……………………………………………………………………1 2、范围……………………………………………………………………1 3、职责……………………………………………………………………1 4、内容……………………………………………………………………1 5、附录……………………………………………………………………18 6、变更记载和原因………………………………………………………18 7、相关文件和记录………………………………………………………19 发放范围： 质量部 质量控制科 修订人 审核人 审核人 批准人 部门 质量控制科 质量控制科 质量保证科 质量部 姓名 刘凤荣 郝松 王爱杰 黄桂福 签名 日期 1.目的：建立微生物限度检查标准操作规程，规范检验人员的操作。 2.范围：适用于检品的微生物限度检查。 3.职责：质量控制科全体人员。 4.内容： 4.1概述: ●微生物限度检查法系指用于判断原料 从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的 教育背景。试验人员应依据所在岗位和职责接受相应的培训，在确 认它们可以承担某一试验前，他们不能独立从事该项微生物试验。 应保证所有人员在上岗前接受胜任工作所必须的设备操作、微生物 检验技术和试验室生物安全等方面的培训，经考核合格后方可上岗。 4.2设备、仪器及用具 4.2.1设备 ●微生物限度室 ○结构和要求：微生物限度室应采光良好、避免潮湿、远离厕所及污 染区（面积不超过10m2，高度不超过2.4m）由缓冲间（2个）、操作 间组成。操作间与缓冲间之间应有样品传递箱，出入操作间和缓冲 间的门不应直对。 ○温度应控制在18～26℃，相对湿度45～65%。 ○操作间 洁净度不应低于C级，局部净化度为A级，或放置同等级 净化工作台。 ○缓冲间 缓冲间内不应放置培养箱和其他杂物。 ○操作台或净化工作台要定期检测其洁净度，应达到A级。净化工作 台中的高效及中效过滤器应根据检测情况，必要时予以更换处理。 ○消毒处理 微生物限度室应在每次操作前、后均用0.1%苯扎溴铵（新洁尔灭）溶液或其他消毒液擦拭操作台及可能污染的死角。开动 层流净化装置，同时用紫外灯照射30min。 ○设备 隔水式恒温培养箱、SPX-250BШ生化培养箱、恒温水浴锅、匀 浆仪、电热恒温干燥箱、冰箱、 空调、LDZX-50KBS型立式压力蒸汽 灭菌器。 4.2.2仪器及器皿 ●菌落计数器、显微镜、PH系列比色计、电子天平或药物天平（感量 0.1g）。 ●玻璃器皿 锥形瓶、研钵、培养皿、量筒、试管及塞、吸管。玻璃 器皿用前应洗涤干净，无残留抗菌物质。吸管口上端距0.5cm处塞 入约2cm的适宜疏松棉花，置吸管桶内或牛皮纸袋中。锥形瓶、量 筒、试管均应加棉塞或硅胶塞，再用牛皮纸包扎。玻璃器皿均于160 ℃干热灭菌2h或高压蒸汽121℃灭菌30min，烘干备用。 4.2.3用具 ●大、小橡皮胶头（放于干净带盖的容器中，并应定期用70%～75% 乙醇溶液浸泡）。 ●无菌工作服、帽、口罩、手套（洗净后配套，用牛皮纸包严）灭菌， 备用。 ●接种环、酒精灯、75%酒精棉球、灭菌剪刀、灭菌镊子、灭菌称样 纸、不锈钢药匙、试管架、打火机、记号笔、不锈钢盆。 4.3试液 4.3.1消毒液：75%乙醇溶液、0.1%新洁尔灭溶液、3%来苏水溶液、5% 碘伏溶液或其他消毒液。 4.3.2稀释剂和试液：配制所需稀释剂、试液。 pH 7.0无菌氯化钠～蛋白胨缓冲液、0.9%无菌氯化钠溶液、二盐酸 二甲基对苯二胺试液、亚碲酸钠试液、无菌0.1%氯化三苯四氮唑溶 液、过氧化氢试液、靛基质试液、三氯甲烷、1mol/L盐酸试液。 4.4培养基：按照《培养基配制标准操作规程》配制检验所需培养基。 营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、4-甲基伞形酮葡糖苷酸培 养基（MUG）、麦康凯琼脂培养基（MacC）、胆盐乳糖培养基、曙红 亚甲蓝琼脂培养基、营养肉汤培养基、乳糖胆盐发酵培养基、四硫 磺酸钠亮绿培养基、胆盐硫乳琼脂培养基、沙门、志贺菌属琼脂培 养基、三糖铁琼脂培养基、溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基、卵黄 氯化钠琼脂培养基、甘露醇氯化钠琼脂培养基、PDP琼脂培养基、亚 碲酸钠（钾）肉汤（或营养肉汤）培养基、含庆大霉素的哥伦比亚 琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、1%聚山梨酯80～玉米琼脂培 养基。 4.5供试品抽样、保存及检验量 4.5.1抽样 ●一般采用随机抽样方法，抽样量应为检验用量（2个以上最小包装 单位）的3倍量（以备复试）。 ●抽样时，凡发现有异常或可疑的样品，应选