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血清学基础 免疫学反应：抗原抗体反应 The Immune Response: Antigen-Antibody Reactions 是抗原与抗体的反应，仅在高等脊椎动物中存在. 这是已知的最精妙复杂的身体抵御外部物质的系统。 In vivo reactions活体中的反应:抗体与入侵细胞结合，补体与抗体结合，导致入侵细胞裂解 一、什么是血清学反应 血清学反应是指相应的抗原与抗体在体外一定条件下作用，可出现肉眼可见的沉淀、凝集现象。在微生物检验中，常用血清学反应来鉴定分离到的细菌，以最终确认检测结果。 1、什么是抗原 抗原（A substance that causes production of an antibody directed against itself）是指能刺激机体免疫系统产生免疫应答而生成抗体和致敏淋巴细胞等免疫应答产物，并能与之发生特异性结合的物质。产生的相应抗体与抗原结合，形成抗原—抗体复合物，产生免疫反应，从而保护机体不受抗原侵害而造成破坏。一般抗原都是外来物体，如细菌、病毒、寄生虫等 。 2、什么是抗体 机体受外来抗原物质刺激后，产生的一种与该抗原发生特异性结合的免疫球蛋白(Ig) 被分为G，A，M, E, D等几类. 最典型的抗体是IgG, 有Y型三维结构, 包含两套重链和轻链。 IgG抗体的结构及与抗原的反应 二、血清学反应的一般特点： 1、抗原抗体的结合具有特异性，但有共同抗原体存在时，会出现交叉反应。 2、抗原抗体的结合是分子表面的结合，这种结合虽相当稳定，但是可逆的。 3、抗原抗体的结合是按一定比例进行的，只有比例适当时，才能出现可见反应。 4、血清学反应大体分为两个阶段进行，但其间无严格界限。第一阶段为抗原抗体特异性结合阶段，反应速度很快，只需几秒至几分钟反应即可完毕，但不出现肉眼可见现象。第二阶段为抗原抗体反应的可见阶段，表现为凝集、沉淀、补体结合反应等。反应速度慢，需几分、几十分以至更长时间。 抗体攻击抗原（中间是抗原） 最适比例示意图 三、血清学反应的类型 1）凝集反应 2）沉淀反应 3）补体结合反应 1、 Agglutination凝集反应 　颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体结合，在电解质参与下所形成的肉眼可见的凝集现象，称为凝集反应（Agglutination reaction）。其中的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。在该反应中，因为单位体积抗体量大，做定量实验时，应稀释抗体。 Agglutination is the process by which particulate antigen such as cells are aggregated to form large, visible aggregates if the specific antibody is present. １）直接凝集反应 颗粒性抗原如细菌和细胞与相应抗体直接结合所出现的反应，称为直接凝集反应(Direct agglution reaction)。 a.玻片凝集法 　是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。如将含有白叶枯病菌抗体的血清与待检菌液各一滴，在玻片上混匀，数分种后若出现肉眼可见的凝集块，即为阳性反应，证明该菌是痢疾杆菌。此法快速、简便，但不能进行定量测定 一种塑料试验板 b.试管凝集法 是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其效价。因为要测定抗体的含量，故将待检查的血清用等渗盐水倍比稀释成不同浓度，然后加入等量抗原，37℃，2—4小时后观察，血清最高稀释度仍有明显凝集现象的，为该抗血清的凝集效价。 试管凝集法示意图 c. Microtiter Agglutination微皿板（96孔板）凝集法 1) Microtiter plates are plastic and usually contain 96 wells2) More efficient way to do assay – as opposed to tubes 微皿板凝集法示意图 ２）间接凝集反应 　将可溶性抗原（抗体）先吸附在一种与免疫无关的，颗粒状微球表面，然后与相应抗体（抗原）作用，在有电解质存在的条件下，即可发生凝集，称为间接凝集反应(Indirect agglutination)。由于载体增大了可溶性抗原的反应面积。当载体上有少量抗原与抗体结合。就出现肉眼可见的反应，敏感性很高。 2、沉淀反应 　可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应（Precipitation）。反应中的抗原称为沉淀原，抗体为沉淀素。由于在单位体积内抗原量大，为了不使抗原过剩，故应稀