CCR4表达与胆囊癌细胞GBC-SD侵袭和转移的关系.pdfVIP

· 632 · 临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol2015Jun；31(6) 网络 出版 时间 ：2015—6—2413：59 网络 出版 地址 ：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1073．R1359．008．html CCR4表达与胆囊癌细胞 GBC—SD侵袭和转移的关系 孙登群，龚仁华，孙艳军，钟兴国，蔡 军，何新苗，刘学停 摘要：目的 探讨趋化因子CCR4对人胆囊癌细胞 GBC．SD增殖、周期、侵袭和迁移运动能力的影响。方法 应用 Westernblot 法检测人不同胆囊癌细胞株中CCR4的表达水平；慢病毒感染胆囊癌细胞GBC—SD；siRNA—CCR4沉默CCR4基因；Westernblot 法鉴定干扰效果。胆囊癌细胞GBC·SD分为三组：GBC—SD、GBC—SD／CCR4-RNAi和GBC—SD／control细胞，CCR4配体CCL17对 这三组细胞进行作用。采用 CCK8法检测三组细胞的增殖能力；流式细胞仪检测细胞周期 ；Transwell小室运动侵袭试验检测 细胞迁移和侵袭能力 ；Westernblot法检测 CCR4基 因沉默后，对其相应配体 CCL17和CCL22蛋白表达的影响。结果 沉默 CCR4基因，对胆囊癌细胞GBC—SD的细胞周期及增殖均无影响，但能显著抑制 GBC—SD细胞的侵袭及运动迁移能力，CCR4基 因的沉默对肿瘤细胞 CCL17和CCL22基因的表达无影响。结论 胆囊癌细胞GBC—SD表达趋化因子受体CCR4，CCR4可以 促进胆囊癌细胞 GBC—SD的侵袭和转移。 关键词 ：胆囊肿瘤；侵袭性 ；关联性；CCR4；siRNA干扰技术 中图分类号：R735．8 文献标志码：A 文章编号：1001—7399(2015)06—0632—05 doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2015．06．008 Relationshipbetween theexpression ofCCR4 and invasion and metastasisofgallbladder cancercellGBC-SD SUNDeng—qun，GONGRen—hua，SUNYan-jun，ZHONGXing—guo，CAIJun，HEXin—miao，LIUXue—ring (DepartmentofGeneralSurgery，AnhuiGeneralHospitalofChinesePeople’sArmedPoliceForces，Hefei241001，China) Abstract：Purpose ToinvestigatetheeffectsofchemotacticfactorCCR4ontheabilityofproliferation，cellcycle，invasion，andmi— grationofhumangallbladdercancercel1．M ethods Western blotwasusedtodetecttheexpressionlevelofCCR4ingallbladdercarci— nomacells．Gallbladdercarcinomacellswasinfectedbymeansofslow virus，theCCR4 genesilencingwasconductedusingsiRNA． CCR4interferencetechnology．GallbladdercarcinomacellsGBC-SDweredividedintothreegroups(GBC—SD，GBC—SD／CCR4R·NAi andGBC—SD／contro1)．CCL17，aligandofCCR4，wasusedtoactonthesethreergoupsofceUs．CCK8methodwasusedtodetectthe cellproliferationabilityofthreegroups．Flowcytometrywasusedtotestcellcycle．Tanswellassaywasappliedtodetectcellmigration andinvasionability．Western blotwasperformedtodetecttheexpressionofitscorrespondingligandsCCL17na dCCL22proteins．Re- suits CCR4genesilencedidnotinfluencecellcycleandproli