基因工程操作的基本程序精品.pptVIP

1．下图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRⅠ 限制酶切割目的基因和该质粒，再用DNA连接酶连接形成重组质粒，然后导入大肠杆菌，最后将大肠杆菌放在四种培养基中培养：a—无抗生素的培养基，b—含四环素的培养基，c—含氨苄青霉素的培养基，d—含四环素和氨苄青霉素的培养基。含重组质粒的大肠杆菌能生长的是 A．a B．a和c C．a和b D．b和c 2．下图是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌” 的示意图。所用的载体为质粒A。若已知细菌D细胞内不含质 粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌后，其上的基因 能得到表达。能表明目的基因已与运载体结合，并被导入受 体细胞的结果是A．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上均能生长繁殖的细胞B．在含氨苄青霉素的培养基细菌和含四环素的培养基都不能生长繁殖的细菌C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长繁殖，但在含四环素的培育基不能生长繁殖的细菌D．在含氨苄青霉素的培养基上不能生长繁殖，但在含四环素的培育基能生长繁殖的细菌 (3)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是　 。 (4)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为　。 写出目的基因导入细菌中表达的过程　 。 (5)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的说明已导入了　　　　，反之则没有导入。 答案：(1)反转录法(人工合成法) (2)Ⅰ　Ⅱ　碱基互补配对 (3)人的基因与大肠杆菌DNA的双螺旋  结构相同 (4)共用一套(遗传)密码子 (5)普通质粒或重组质粒(缺一不给分) （二）、鉴定（个体生物学水平） 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ①方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原抗体杂交 ②过程: 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA 　多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应变化的个体进一步培养、研究。 　　例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 包括抗虫，抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品需要与天然产品的活性比较，以确定其功能是否相同等 个体水平鉴定 是否显示出杂交带 抗原—抗体杂交 目的基因是否翻译出蛋白质 第三步 是否显示出杂交带 分子杂交技术（DNA mRNA 之间） 目的基因是否转录出mRNA 第二步 是否显示出杂交带 DNA分子杂交（DNA和DNA之间） 转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 第一步 分子 检测 结果显示 方法 检测内容 步骤 类型 目的基因的检测和鉴定分子水平和个体水平上的比较 1.科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并以质 粒为运载体，采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金 茶花新品种。下列有关说法正确的是： A．质粒是最常用的运载体之一，它仅存在于原核细 胞中。 B．获得抗枯萎病基因并将其连接到质粒上，用到的 工具酶是DNA连接酶。 C．为保证金茶花植株抗枯萎病，只能以受精卵细胞作 为基因工程的受体细胞。 D．通过该方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子 不一定含抗病基因。 D 2.利用基因工程生产蛋白质药物的方法之一是将人的 基因转入动物体内，再饲养这些转基因动物，从动物 乳汁或尿液中提取药物。这一过程不涉及： A．DNA以其一条链为模板合成RNA B．DNA按照碱基互补配对原则自我复制 C．RNA以自身为模板自我复制 D．按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质 C 4.1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基 因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达 成功。如下图，请据图回答问题。 (1)此图表示的是采取_____ ___方 法获取_____ __基因的过程。 (2)图中①DNA是以____ _____为 模板，___ ____形成单链DNA， 在酶的作用下合成双链DNA，从而获 得了所需要的________。 人工合成基因 原胰岛素目的 原胰岛素mRNA 原胰岛素目的基因 逆转录 (3)图中②代表的是_________酶，在它的作用下将质粒 切出__________末端。 (4)