大型海藻及纳米料对赤潮中肋骨条藻的抑制作用研究.pdfVIP

大型海藻及纳米材料对赤潮中肋骨条藻的抑制作用研究 摘要 随着现代社会经济的高速发展，近海污染日趋严重，有害赤潮发生频率增加、 裁模扩大，已经给全球各地的渔业资源、生态环境及水产养殖均造成严重的损失， 甚至危害到入类的健康。赤潮已成为全球性的海洋公害。传统的控制赤潮静方法 由于固有缺陷，已经无法满足人们的要求。水生系统大型植物对微藻的化感抑制 作用的发现以及当前纳米材料抑制微生物产品的开发为人们提供了控制赤潮的 新思路。本文通过研究8种大型海藻及6种纳米级金属氧化物颗粒对中肋骨条藻的 生长抑制效应，筛选出抑藻效果好的大型海藻或纳米材料，分离提取大型海藻中 的抑藻化感物质并鉴定其结构，初步探寻化感物质及纳米材料的抑藻机理，为利 用大型海藻高效化感物质以及新型纳米材料进行赤潮的防治提供科学依据。 本研究以微藻生长抑制率(inhibition concentration,ECso)为评价指标比较了8种大型海藻：孔在莼(Utvapertusa)、长 浒苔(Enteromorphaclathrata)、紫菜(Porphyra filicina)、海带(Laminariajaponica)、裙带菜(Undariapinnatifida)、羊栖菜 用液液萃取和硅胶柱层析方法分离长浒苔中的化感物质，用色谱一质谱联用技术 鉴定其主要成分，揭示大型海藻长浒苔抑藻的化学基础。选择乙酸乙酯萃取褶B， 通过考查其对藻缨胞的超氧化物歧化酶(SOD)活力，愿二醛(MDA)含量和离子选 择透过性以及叶绿素a含量的影响，探讨其抑藻机理。 研究结果表明8种大型海藻干粉末的水浸体液的抑藻120h的半效应浓度值 栖菜1．1 抑制率结果，具有最强化感抑制作用的是长浒苔和孔石莼两种大型海藻。其中长 浒苔的化感抑制作用是首次报道。对长浒苔的干粉末中的抑藻化感物质提取分 离，哩种溶剂(石油醚，乙酸乙酯，蒸馏水和正丁醇)液液萃取组分抑藻实验表踞 乙酸乙酯相(B)的抑藻效果最好，EC50值仅为0．08mg／L。硅胶柱层析进一步分离 产物的抑藻结果表明环已烷洗脱相(1A)和环己榭丙酮洗脱相(1B)具有抑藻效 果，72h的EC50值分别3．81mg／L和4．09mg／L。气相色谱一质谱联用检测结果显 示长浒苔乙酸乙酯相提取物中含有16种物质等。化感物质的可能替代物实验结 果显示供试的四种药品中仅肉豆蔻酸具有较强的抑藻效果，72h的EC50值(EC(50． 72h))为8．43mg／L。添加了乙酸乙酯相(B)的藻细胞培养液在处理浓度0．1mg／L时 即开始显示出超氧化物歧化酶(SOD)活力下降，丙二醛(MDA)含量有应激性升 高，．细胞K+含量渗出增加，叶绿素a降解。 长浒苔可显著抑制赤潮中肋骨条藻的生长，从长浒苔中用乙酸乙酯提取的化 感组分B是当前报道的抑藻作用最强的化感组分。十四酸是其中可能的一种抑 藻化感物质；长浒苔的抑藻机理可能通过降低藻类抗氧化物酶活性，导致其体内 累积过量活性氧，从而引发一系列藻细胞结构破坏，正常的代谢功能逐渐丧失， 最终引起藻细胞死亡。长浒苔提取的化感组分B含有高效的抑藻化感物质。 此外我们还初步探索了6种纳米金属氧化物二氧化钛(锐钛矿相}玎R3和金红 MC2A和丫相MC2R)对中肋骨条藻的生长的抑制效应。以微藻生长抑制率 (inhibitionrate，瓜)和半效应浓度(50％effective 叶绿素a含量为评价指标，筛选具有高抑藻能力的纳米材料。结果表明仅HR3，DJ3 250．7mg／L，DJ3757．6mg／L，MC2R1111．2mg／L。SPl对中肋骨条藻甚至表现出了 促进作用，其抑制率在整个周期最低达到了．70％。对叶绿素a的含量影响结果 显示了和生长抑制类似的规律，即HR3，DJ3和MC2R降低了赤潮藻的叶绿素a 含量。 后续工作应当进一步分离长浒苔其中的化感物质，深入探索化感物质及纳米 材料的抑藻机理。 关键词： 大型海藻， 纳米材料，中肋骨条藻， 抑制 Theresearchofinhibi on tide effectred tory SkeIetonemacostatummacroaI andnanomaterials