Sirt1过表达对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞株凋亡的影响及其机制的分析.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………一1 英文摘要……………………………………………………………………一3 英文缩写……………………………………………………………………一5 研究论文Sirtl过表达对TGF—B1诱导人肾小管上皮细胞株凋亡的影响 及机制研究 前言……………………………………………………………………………………………·6 丹IJ吾……………………………………………………………………………………………‘ 材料与方法…………………………………………………………一6 结果……………………………………………………………………‘14 附图……………………………………………………………………一16 附表……………………………………………………………………一22 讨论……………………………………………………………………·23 结论……………………………………………………………………·26 参考文献……·…………………………………………………………·27 综述Sirtl和炎症………………………………………………………’30 致谢…··……………………………………………………………………～41 个人简历……………………………………………………………………·42 万方数据 中文摘要 Sirtl过表达对TGF．131诱导人肾小管上皮细胞株凋亡的影响及 机制研究 摘 要 目的：肾闻质纤维化是肾脏疾病终末期的共同特征。肾小管上皮细胞 可通过多种方式主动参与肾间质纤维化的发生与发展。在多种肾脏疾病的 动物模型以及人体多种肾脏疾病病理标本上发现，问质纤维化愈重的地方， 细胞凋亡数量愈多，问质纤维化程度与细胞凋亡数量成正相关。本研究着 重观察Sirtl过表达对TGF．6l诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机 制研究。 方法：将体外培养人肾小管上皮细胞分为正常对照组、TGF一131N激 测细胞凋亡；流式细胞术及hoechst33258染色法分别检测细胞凋亡百分比； Western blot检测Sirtl、CTGF、Bax、Bcl．2的表达；realtime．PCR裣测Sinl、 Sirtl表达。 学方法检NU 的影响：较正常对照组相比，TGF．Bl刺激人肾小管上皮细胞SirtlmRNA 及蛋白表达均显著降低沪O．01)。免疫细胞化学检测显示，Sirtl主要表达于 人肾小管上皮细胞的细胞核，对照组呈强表达，TGF．Bl刺激组的Sirtl表 达显著低于正常对照组。②TGF．Bl对Sirtl活性的影响：活性比色法定量 检测显示TGF．D1刺激人肾小管上皮细胞Sirtl活性较正常对照组显著降 上皮细胞表达显著升高(P0．01)，表明Sirtl基因成功导入了人肾小管上皮 升高及小管上皮细胞凋亡相关指标影响：与正常对照组相比，TGF—pl刺 万方数据 中文摘要 及FCM三种检测细胞凋亡技术均显示，与正常对照组相比，在TGF一6l 刺激下，人肾小管上皮细胞凋亡百分比显著增加(尸O．01)；与TGF．侈1 刺激组相比，Sirtl过表达能够显著减少TGF．p1诱导的细胞凋亡百分比 伊O．05)。． 结论： ： 达显著下降，同时细胞凋亡明显增加。这些结果提示TGF一131／CTGF信号 传导途径及Sirtl下降可能因为与细胞凋亡密切相关而参与了肾间质纤维 化的发生、发展过程。 2Sirtl过表达能够抑制TGF．Bl诱导的人肾小管上皮细胞凋亡，并且 改善CTGF水平升高，提示Sirtl过表达保护作用的实现可能是部分通过 抑制CTGF实现的。 关键词Sirtl，TG