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两歧双歧杆菌驯化及培养条件优化的研究 摘要 本文以两歧双歧杆菌为出发菌株，通过培养的方式将两歧双歧杆菌迸行了耐 氧、耐酸和耐胆盐驯化，经过驯化以后的两歧双歧杆菌，其耐氧、耐酸、耐胆盐 性能均得到一定程度的改善。驯化后的两歧双歧杆菌能够在兼性厌氧的条件下稳 定生长，其菌体生长和产酸情况均较未经驯化的原始菌优良。 分别选取胡萝卜汁、马铃薯汁和西红柿汁类天然增殖因子，以及低聚木糖、 低聚果糖、乳糖和半乳糖类作为增殖因子进行研究。分析讨论了各种增殖因子的 最佳添加量以及在此添加量下的生长曲线比较。研究表明：前三种增殖因子的最 佳添加量均为3％，且增殖影响的大小依次为：胡萝卜汁)马铃薯汁)西红柿汁； 而在功能糖类增殖因子中，低聚果糖和半乳糖的增殖作用不明显，低聚木糖和乳 糖的增殖作用相对较为明显，其中低聚木糖的最佳添加量为O．8％，乳糖的最佳 添加量为1．O％，在此添加量下分别作了生长曲线的比较。 采用正交实验法确定了两歧双歧杆菌的优化培养基组成以及优化培养条件。 其中培养基优化的结果为：大豆蛋白胨1．5％、胰蛋白胨O．8％、酪蛋白胨0．896、酵 仍然以原始比例添加。培养条件优化的结果为：初始pH值8．0，接种量5％，优化 菌体生长种龄为24h，优化产酸种龄为36h，培养温度41℃。 在兼性厌氧前提下，实现两歧双歧杆菌在发酵罐上的生长正常，其菌体量和 产酸量均高于三角瓶培养，葡萄糖利用也较充分。在发酵罐上用最优培养基进行 两歧双歧杆菌的流加发酵，其OI)600值能达1，670以上，此时采用厌氧环境下平 X 板活菌计数，总菌数为6，3 采用苯酚一硫酸法测定了两歧双歧杆菌产胞外多糖的曲线；初步确定了双歧 杆菌产胞外糖的最佳条件为：初始pH值8．0、接种量5％、温度37C、种龄36h， 这～条件下产糖量不低于270．Omg／L。 关键词：两歧双歧杆菌；驯化；增殖因子；优化；流加发酵；胞外多糖 ium l ofBifidobacter i OSonDomesti cat Stud ng i mi zi i ts condi ti ons bifidumand growth Opt ng Abstract withthetrad—— AstrainofBifidobacteriumbifidumwasdomesticated the bilesalt— itionalcultivationmethod．After oxygen一、acid—and this resistantabilitiesof 8ifidobacterium resistancedomestication。the in domesticatedstraincouldwellboththe bYfidumwereenhanced．The grow andanaerobic cell andconcentra- oxygen environment，thedensity